【摘 要】
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[目的]螺旋霉素是一种多组分的大环内酯类抗生素,被广泛用作兽药或饲料添加剂.螺旋霉素随牛奶等动物源性食品进入人体后可能产生各种毒性作用、过敏反应等.因此,对螺旋霉
【机 构】
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中国农业大学动物医学院 北京100193
【出 处】
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2013年中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十二次学术讨论会
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[目的]螺旋霉素是一种多组分的大环内酯类抗生素,被广泛用作兽药或饲料添加剂.螺旋霉素随牛奶等动物源性食品进入人体后可能产生各种毒性作用、过敏反应等.因此,对螺旋霉素等兽药小分子在动物性食品中残留进行检测监控具有重要意义.[方法]本研究中,我们采用羧甲基羟胺、羰基二咪唑和琥珀酸酐对螺旋霉素进行半抗原改造制备免疫原,采用羧甲基羟胺法制备的免疫原免疫小鼠成功制备五株高特异性单克隆抗体.通过对这五铢单克隆抗体与相应的包被原配对、筛选和优化,单克隆抗体3B10对于螺旋霉素的50％抑制浓度(IC50)为0.97ng/mL.该单克隆抗体3B10具有很高的特异性,对于多数大环内酯类药物的交叉反应率较小(＜0.1％).[结果]本研究建立了一种基于单克隆抗体3B10的间接竞争ELISA方法用于检测牛奶中螺旋霉素残留.该ELISA方法检测牛奶样品的检测限为2.51 μg/kg.空白牛奶添加(5,10和50μg/kg)时,回收率为81％至103％,变异系数介于5.4至9.6％,符合欧盟、美国和中国关于残留免疫检测方法的准确性和精密度要求.[结论]本研究建立的ELISA方法适用于快速筛选牛奶中螺旋霉素残留,对于监控牛奶中螺旋霉素残留具有重要意义.
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