脂多糖体外刺激对未成熟星形胶质细胞氧化损伤的机制研究

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目的:分别探讨脂多糖(LPS)体外刺激及予表没食子儿茶素没食子酸酯(TP-EGCG)干预后未成熟星形胶质细胞GFAP+/BrdU+细胞数百分比、总氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量的变化,及予TP-EGCG干预后凋亡细胞数/总细胞数百分比的变化。方法:LPS(1、5、10μg/ml)分别刺激1、3、7天,GFAP+/BrdU+双抗体免疫荧光法检测GFAP+/BrdU+细胞数百分比的变化;LPS(5、10μg/ml)分别刺激1、3、7天,比色法检测星形胶质细胞总SOD活力和MDA含量的变化;予TP-EGCG干预LPS(5¨咖1)刺激3天后,GFAP+/BrdU+双抗体免疫荧光法检测GFAP+/BrdU+细胞数百分比的变化,比色法检测星形胶质细胞培养液总SOD活力、MDA含量变化及FUNEL试验检测凋亡细胞数/总细胞数百分比的变化。结果LPS(1、10μg/mL)刺激1d时,增殖细胞比例较对照组减少(P<0.05);刺激3d时,LPS(5斗咖L)刺激后星形细胞增殖活性较对照组增加(P<0.05),而LPS(10μg/mL)刺激后增殖细胞比例较对照组减少(P<0.05);LPS(5μg/mL)刺激7d时,星形胶质细胞增殖活性亦较对照组增加(P<0.05)。LPS(5、10μg/ml)分别刺激1、3、7天时星形胶质细胞培养液总SOD活力较对照组差异均无显著意义(P>0.05)。LPS(5μg/ml)刺激3天时星形胶质细胞培养液MDA含量较对照组明显增加(P<0.05),LPS(10μg/m1)刺激1、3、7天以及LPS(5μg/ml)刺激1、7天时MDA含量较对照组差异无显著意义(P>0.05)。予TP-EGCG干预后刺激3天星形胶质细胞培养液GFAP+/BrdU+细胞数百分比较LPS组下降(P<0.05),与对照组比较差异不明显(P>0.05),总SOD活力与LPS组及对照组比较明显减少(P<0.05),MDA含量较LPS组比较明显减少(P<0.05),但MDA含量与对照组比较差异不明显(P>0.05)。LPS刺激3天时凋亡细胞数/总细胞比百分比较对照组明显增加(P<0.05),但予IP-EGCG干预后刺激3天其百分比明显减少(P<0.05)。结论:不同浓度LPS体外刺激对星形胶质细胞增殖活性及氧化损伤的影响程度可能是不同的,TP-EGCG能改变LPS刺激条件下星形胶质细胞增殖活性,其对星形胶质细胞及LPS体外刺激的星形胶质细胞可能有抗氧化、抗凋亡作用。
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