目的:在工程化组织体外构建过程中由于受到传质限制,使构建组织的尺寸仅在毫米级水平,难以满足临床治疗的需求.本研究突破传统组织构建的思路,提出了"微构重塑技术"的新思想,以在体外构建厘米级的细胞活性好、胞外基质分布均匀的工程化组织. 方法:采用大孔微载体在搅拌式生物反应器中制备微组织,将微组织在灌注生物反应器中进行组装,通过灌注培养形成大型工程化组织. 结果:制备的微组织细胞活性高、胞外基质生成丰富且分布均匀;通过调节微载体浓度、细胞密度、抗坏血酸磷酸酯盐和搅拌转速等操作参数可有效调控微组织聚团尺寸;采用细胞增殖和成骨诱导两步法成功制备了骨微组织，且碱性磷酸酶活性和钙基质沉积随诱导时间延长而增加，流体刺激与Ⅰ型胶原基质均可促进间充质干细胞的成骨分化。在自制的灌注生物反应器中组装微组织，可形成厘米级大型工程化组织;进一步在灌注装配过程中引入通道，与无通道工程化组织相比，多通道工程化组织细胞密度和细胞活性明显提高，细胞与胞外基质分布更均匀。 结论:采用“微构重塑技术”可以实现组织性能良好的厘米级工程化组织的体外构建。研究结果为体外大型工程化组织构建技术的研究和开发提供科学指导，并为将来组织工程产品的工业化生产及临床应用奠定基础。