【摘 要】
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目的基于MAPK信号转导途径及干扰素-产生相关信号途径,研究咖啡酸乙酯(DDC-105)抑制T淋巴细胞活化的分子机制,为咖啡酸乙酯开发成治疗自身免疫性疾病新药奠定基础。方法 CCK-
【机 构】
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云南中医学院第一附属医院中心实验室; 云南中医学院第一附属医院风湿科;
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目的基于MAPK信号转导途径及干扰素-产生相关信号途径,研究咖啡酸乙酯(DDC-105)抑制T淋巴细胞活化的分子机制,为咖啡酸乙酯开发成治疗自身免疫性疾病新药奠定基础。方法 CCK-8法和ELISA法分别测定咖啡酸乙酯对丝裂原诱导脾淋巴细胞增殖及细胞因子(IL-2、IFN-和IL-6)产生水平;建立卵清蛋白(OVA)诱导的抗原特异性免疫反应,检测咖啡酸乙酯体内给药对T细胞活化及细胞因子(IL-2、IFN-)分泌水平;实时荧光定量PCR检测Th1型细胞因子(IL-2、IFN-)及相关转录因子(T-bet和STAT1)的mRNA表达情况;Western blot测定TCR/CD3和CD28信号介导MAPK信号通路(p-38和ERK1/2)的磷酸化水平。结果咖啡酸乙酯显著抑制ConA诱导的正常小鼠脾淋巴细胞增殖和细胞因子(IL-2、IFN--和IL-6)产生。体内口服咖啡酸乙酯明显抑制OVA诱导的抗原特异性T细胞增殖及细胞因子IL-2和IFN-产生水平。在转录水平上,能够显著抑制IL-2、IFN-和bet STAT1mRNA表达水平。咖啡酸乙酯能有效抑制TCR/CD3和CD28信号介导MAPK信号通路(p-38和ERK1/2),其中对p-38抑制最为明显。结论 :地胆草有效成分咖啡酸乙酯可能通过抑制MAPK信号途径(p-38和ERK1/2)磷酸化,从而干预IFN-/STAT1/T-bet/IFN-信号途径,下调转录因子bet和STAT1表达,抑制IFN-产生及细胞活化。
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