过氧化氢酶在乳酸菌的表达及其在葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎模型中的作用

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本试验旨在研究外源重组乳酸菌对葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎的缓减作用。试验构建了过氧化氢酶表达载体pLK126并转化入发酵乳杆菌中,经过测定酶活来确定过氧化氢酶的表达情况。将40只BALB/c小鼠分成5组,(1)对照组:小鼠PBS灌胃;(2)DSS组:服用2.5%的DSS小鼠,同时PBS灌胃;(3)维生素E组:服用2.5%DSS同时维生素E灌胃;(4)野生型组:服用2.5%DSS同时用野生型发酵乳杆菌灌胃(1×10~9CFU/天);(5)CAT组:服用2.5%DSS同时用产过氧化氢酶发酵乳杆菌灌胃(1×10~9CFU/天)。试验期为10天,10天后取结肠内容物,结肠组织,测定内容物过氧化氢酶酶活、SOD活性、乳酸菌数、大肠杆菌数、双歧杆菌数等,以及结肠组织脂质氧化物浓度以及结肠组织损伤评分。整个试验期记录疾病活动指数并评分。体外实验发现,重组发酵乳杆菌能够高效的清除过氧化氢,通过测定酶活发现,重组菌株清除过氧化氢的能力比野生型高20倍,说明过氧化氢酶在发酵乳杆菌中成的表达。体内实验发现,小鼠服用重组发酵乳杆菌(CAT组)能明显提高结肠内容物中过氧化氢的活性(P<0.05),降低脂质氧化物浓度(P<0.05),降低组织损伤(P<0.05)。同时,小鼠服用野生型发酵乳杆菌和重组发酵乳杆菌都能明显提高食糜中乳酸菌数量但两种组之间的效果没有明显差异(P>0.05)。由此可见表达过氧化氢的重组乳杆菌能提高对DSS诱导小鼠结肠炎的抗氧化效果。
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