【摘 要】
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目的:探讨金属硫蛋白1X(metallothionein,MT1X)在肺癌耐药细胞株(A549/DDP)顺铂耐药中的作用及其可能机制。 方法:通过化学合成针对MT1X的siRNA段抑制其在A549/DDP中的表
【机 构】
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南华大学肿瘤研究所,湖南 衡阳 421001
【出 处】
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中国病理生理学会第十四届肿瘤专业委员会、第十五届免疫专业委员会联合学术会议
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目的:探讨金属硫蛋白1X(metallothionein,MT1X)在肺癌耐药细胞株(A549/DDP)顺铂耐药中的作用及其可能机制。
方法:通过化学合成针对MT1X的siRNA段抑制其在A549/DDP中的表达,同时将MT1X真核表达质粒导入其亲本细胞株A549后,分别采用实时定量PCR及WB检测MT1X在各处理细胞株中的表达差异,进而应用MTr及平板克隆形成实验检测干扰前后细胞对顺铂的药物敏感性变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,最后应用Western印迹法检测顺铂及相关抑制剂处理前后A549/DDP和A549细胞中PI3K、Akt、P-Akt、NFrdB(P65)的表达变化情况。
结果:针对MT1X的siRNA片段能在RNA及蛋白水平有效抑制其在A549/DDP中的表达，与对照组相比，MT1X表达被抑制后，A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显提高，增值能力和平板克隆形成率明显降低(P<0.05)，细胞凋亡率显著增高(P<0.05);与此相反，高表达MTIX后A549细胞对顺铂的敏感性降低，细胞增殖及抗凋亡能力均有明显提高。
结论:MT1X可通过调控PI3K/Akt/NFxB介导A549/DDP细胞顺铂耐药，抑制MT1X表达能提高体外培养的人肺癌细胞对顺铂的敏感性。
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