【摘 要】
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目的:建立检测胰岛素受体酪氨酸激酶(IRTK)活性的转基因细胞系,为筛选胰岛素受体(IR)的非肽小分子激动剂提供新的模型。方法:用克隆有胰岛素受体基因、STAT5b基因和STAT5应元件靶控的荧光素酶报告基因的质粒共转染CHO细胞,G418筛选阳性克隆,然后检测胰岛素和AG1024作用下阳性克隆细胞荧光素酶的表达。结果:转染的CHO细胞经G418筛选得到一株具有较高诱导表达率的细胞株,胰岛素对该细
【机 构】
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西华大学生物工程学院 四川 成都 610039
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目的:建立检测胰岛素受体酪氨酸激酶(IRTK)活性的转基因细胞系,为筛选胰岛素受体(IR)的非肽小分子激动剂提供新的模型。
方法:用克隆有胰岛素受体基因、STAT5b基因和STAT5应元件靶控的荧光素酶报告基因的质粒共转染CHO细胞,G418筛选阳性克隆,然后检测胰岛素和AG1024作用下阳性克隆细胞荧光素酶的表达。
结果:转染的CHO细胞经G418筛选得到一株具有较高诱导表达率的细胞株,胰岛素对该细胞株的荧光素酶的诱导表达率具有很好的剂量依赖性和时间依赖性,AG1024能有效抑制胰岛素的诱导表达作用。
结论:该细胞模型具有良好的灵敏性、特异性和稳定性,可应用于胰岛素受体激动剂的高通量筛选。
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