【摘 要】
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目的:研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)活化的影响及相关机制,阐明DHM对肝纤维化的防治作用. 方法:不同浓度(1,10,30μM)的DHM 处理HSC-T6
【机 构】
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第三军医大学营养与食品安全研究中心,重庆市医学营养研究中心,重庆市营养与食品安全重点实验室,重庆 400038
【出 处】
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中国营养学会第十三届全国营养科学大会暨全球华人营养科学家大会
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目的:研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DHM)对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)活化的影响及相关机制,阐明DHM对肝纤维化的防治作用. 方法:不同浓度(1,10,30μM)的DHM 处理HSC-T6细胞24 h后,CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,免疫荧光细胞化学法检测细胞α-SMA的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养上清液中细胞外基质MMP-1、TIMP-1和COL-Ⅰ的含量,和western blotting法检测肝星状细胞活化相关基因AMPK和Smad2/3的磷酸化水平.结果:低于30μM 的DHM处理细胞后细胞活力无显著改变(P>0.05),DHM作用浓度为60μM时,HSC-T6细胞活力被显著抑制,细胞存活率为51.89%,后续试验选择30μM为DHM的工作浓度.免疫荧光细胞化学法检测显示,HSC-T6细胞表达肝星状细胞活化表型特定蛋白α-SMA,DHM处理后α-SMA表达明显减少;ELISA检测结果表明,DHM处理后细胞培养上清液中TIMP-1和COL-Ⅰ含量均较对照组显著降低(P<0.05),MMP-1含量较对照组显著升高(P<0.05);Western blotting检测结果提示,DHM处理后AMPK 和Smad2/3)的磷酸化水平显著增加,而Smad7的表达显著下降.结论:DHM能够显著抑制肝星状细胞的活化以及细胞外基质的表达,从而减少细胞外基质在肝脏的合成和沉积,发挥抗肝纤维化作用.
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