【摘 要】
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本研究用无特定病原(SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鸡源分离株A/Chicken/HuaBei/1/2003(H5N1),用Trizol试剂提取鸡胚尿囊液中的病毒基因组总RNA,利用禽流感病毒8段基因的特异性引物,通过反转录聚合酶链式反应(RTPCR)技术分别扩增该病毒的8个基因片段的cDNA.结果8个基因的全序列均扩增出来,经纯化回收后测序.序列分析表明;该病毒是H5N1亚型HP AIV.A/Chic
【机 构】
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内蒙古农业大学动物科学与医学学院,呼和浩特,010018 北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,1
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会
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本研究用无特定病原(SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鸡源分离株A/Chicken/HuaBei/1/2003(H5N1),用Trizol试剂提取鸡胚尿囊液中的病毒基因组总RNA,利用禽流感病毒8段基因的特异性引物,通过反转录聚合酶链式反应(RTPCR)技术分别扩增该病毒的8个基因片段的cDNA.结果8个基因的全序列均扩增出来,经纯化回收后测序.序列分析表明;该病毒是H5N1亚型HP AIV.A/Chicken/HuaBei/1/2003(H5N1)毒株的HA基因与A/Chicken/Hongkong/FY150/01(H5N1)和A/Duck/Guangdong/01/01(H5N1毒株的同源性最高,说明它们起源于同一种系.NS基因与97年香港人源和禽源分离毒株的亲源关系最近,说明它们属于同一个基因群系.
其他文献
本文根据GeneBank中禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)NP、PA和PB1基因保守区序列设计、合成3个小干扰RNA(Small interference RNA,siRNA)--siRNA-NP、siRNA-PA和siRNA-PB1;将siRNA和转染试剂Silent-fect按1:3(ul:ug)比例混合均匀后在鸡胚成纤维细胞(CEF)中转染,4h后接种AIV.
本文以H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因cDNA为模板,扩增HA基因,PCR产物酶切后与pcDNA3.1(+)质粒进行重组.以重组质粒作为基因疫苗免疫8周龄Balb/C小鼠,应用杂交瘤技术进行细胞融合,通过血凝抑制试验(HI)和ELISA试验筛选,各获得一株阳性细胞株,经三次亚克隆后都能稳定分泌H9 AIV特异性抗体.特异性检测表明单抗与NDV、H5亚型AIV、产蛋下降综合征(EDS76)病毒毒
为了解农村家养鸭高致病致禽流感隐性感染情况,2004-2006年,本研究在湖南省30个县(市区)及31个家乙禽交易市场分别采集家养鸭和待出售鸭的拭子样品4910份和877份,混样后分别采用H5亚型禽流感RT-PCR试验、通用型禽流感RT-PCR试验、接种SPF鸡胚进行病毒分离和亚型鉴定等方法进行检测,结果H5亚型禽流感RT-PCR试验检测阳性样品1份,通用型禽流感RT-PCR试验检测阳性样品6份,
本实验利用禽流感重组核蛋白作为包被抗原,建立了检测鸭血清禽流感抗体的间接ELISA方法,通过对各个工作组份反应条件的优化,确定的最佳工作条件为:包被抗原1∶300稀释(蛋白含量为8μg/mL);待检血清1∶200稀释;酶标抗体1∶7000稀释;封闭时间、待检血清和酶标二抗最佳作用时间均为1.5h.通过对907份鸭血清样本(包括141份免疫血清和766份现地血清)进行检测,经符合实验(AGP和HI)
本研究用无特定病原(SPF)鸡胚增殖禽流感病毒鸭源分离株A/Duck/Guangxi/2/2000(H5N1),Trizol试剂提取鸡胚尿囊液中的病毒基因组总RNA,利用禽流感病毒8段基因的特异性引物,通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术分别扩增该病毒8个基因片段的cDNA.扩增出8段基因的全序列,经纯化回收后测序,进行序列分析.结果表明:A/Duck/Guangxi/2/2000(H5N
为探索临床实用、快速准确的禽流感检测方法,我们用禽流感病毒乳胶凝集试验、禽流感病毒ELISA、禽流感病毒免疫金标快速诊断试纸条和禽流感RT-PCR试验对93份可疑组织病料和387份禽拭子样品分别进行比对检测,结果乳胶凝集试验、ELISA试验、免疫金标试纸条和RT-PCR试验对93份组织检测的阳性率分别为23.6％,29％,21.5％和21.5％.禽流感病毒乳胶凝集试验、禽流感病毒ELISA试验、通
本研究在北京地区采集并检测了461份候鸟与145份老鼠的血清样品.其中候鸟对禽流感H1、H5、H7和H9亚型的血凝抑制试验抗体阳性率分别为0、31.67％、3.33％和18.66％(0/360、146/461、12/360和86/461);老鼠对禽流感H1、H5、H7和H9亚型的血凝抑制试验抗体阳性率全部为0.此次调查发现候鸟的血清样品中禽流感H5和H9亚型的血凝抑制试验抗体阳性率比较高,这同国内
为进一步分析禽流感病毒H9N2 HB分离株血凝素(HA)基因的特性,本研究参照已发表H9亚型禽流感HA基因序列设计了1对引物,采用RT-PCR技术,以禽流感病毒H9N2 HB分离株RNA为模板,扩增了HA全基因并进行同源性比较,绘制系统发育进化树.结果表明,扩增片段长1683个核苷酸,包含了完整的HA基因的开放阅读框架.推导氨基酸序列与H5N1序列进行比较分析,H9N2 HA蛋白裂解位点上游缺少4
本研究克隆了-株鸡源AIV H5N1亚型PQ分离株的NA基因,并对其进行了序列分析.结果表明NA基因开放阅读框架内含有1350个核苷酸,编码449个氨基酸.NA基因与HK156/97、GD1/96)和HKYU822.2/01的核苷酸和氨基酸同源性分别88.3％、97.4％、97.9％和91.5％、92.8％、98.5％.PQ分离株的NA茎部有20个氨基酸的缺失,从而使50、58、63、68位糖基化
本研究克隆了一株鸡源AIV H5N1亚型PQ分离株的HA基因,并对其进行了序列分析.结果表明HA开放阅读框内含有1707个碱基,编码568个氨基酸,其中HA1 330个氨基酸,HA2 222个氨基酸.HA基因与HK156/97、GD1/96)和HKYU822.2/01的核苷酸和氨基酸同源性分别为96.3％、96.1％、98.2％和96％、97.4％、98.4％,糖基化位点和受体结合位点均变化不大.