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目的:全球慢性肾脏病患者的数量不断增长,而传统的中医治疗,可延缓慢性肾脏病的进展。本研究拟通过1H NMR技术及病理学方法探讨冬虫夏草对5/6肾切除所致大鼠慢性肾衰的保护作用的机制。方法:SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠,鼠龄6～8周,体重150～200g。大鼠分为三组:①未经治疗的5/6肾切除组(OP组,n=16);②口服冬虫夏草治疗(4mg/kg.d)5/6肾切除组(CS组,N=16);③假手术组(SO组,N=16)。在行5/6肾切除术后4和8周,处死大鼠,收取血清和尿液及肾组织行1HNMR分析研究,利用多元统计技术和统计代谢的相关性比较分析,以确定相关组之间的肾脏提取物的代谢变化情况。部分肾组织行HE,PAS染色及电镜检测,进行病理学观察。免疫组织化学方法观察各组肾脏组织CD68、成纤维细胞特异性蛋白(FSP-1)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)等表达变化;RT-PCR技术检测各组肾组织FN、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、a-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3 mRNA水平变化。结果:在代谢组学研究中,研究发现OP,CS和SO组存在着完全不同的代谢模式,并进一步发现这些不同代谢模式主要为:柠檬酸循环,细胞内外膜渗透压调节,支链氨基酸代谢及脂质代谢。这与以往研究认为冬虫夏草对残肾保护作用与钙离子拮抗剂不同。与so组比较,4周op组血肌酐(CREA)升高114.4%,尿素氮(BUN)升高110.6%,尿白蛋白肌酐比(UACR)升高84.4%,血白蛋白(ALB)降低4.5%。病变明显,表现为炎性细胞浸润、细胞外基质沉积增多、足突融合以及线粒体肿胀、空泡变性自噬小体形成等。CD68阳性细胞数增加3.34倍,FSP-1阳性细胞数增加2.95倍,FN、COLL-1、α-SMA等细胞外基质成分阳性表达面积分别增加6.21%、4.99%、2.21%以及TGF-β等促纤维化因子mRNA水平也都有明显的增多。8周op组病变更加明显,各种纤维化因子和促纤维化因子进一步升高。经冬虫夏草治疗后肾功能部分恢复,肾小球硬化和肾间质纤维化程度明显缓解,肾脏纤维化因子和促进纤维化因子表达量也显著减少。结论:利用1HNMR技术阐明了慢性肾衰状态下肾脏代谢组变化表达谱同时,证实冬虫夏草治疗可以改变其代谢组的表达谱,冬虫夏草能明显拮抗5/6肾切除大鼠肾脏纤维化程度,可能是通过减轻炎性细胞浸润,减少细胞外基质沉积,减轻线粒体损伤,改善能量代谢等机制,为进一步研究肾脏纤维化的分子发病机制和冬虫夏草治疗的作用机制创造了条件。