目的:近年来,我国儿童恶性肿瘤的发病率逐年上升,成为威胁儿童健康的重要因素。放,化疗等治疗手段在杀死肿瘤细胞的同时,也会导致小儿生殖细胞的损害和凋亡。这些患儿在到达生育年龄的时候,由于缺乏生殖干细胞不能产生精子而无法生育。精原干细胞(spermatogonial stem cell)是存在于睾丸生精小管,不断增殖和分化以产生精子的一类干细胞。动物实验提示,精原干细胞移植可以恢复化疗后不育小鼠的生殖能力。对于青春期前的儿童患者,由于没有精子可供冻存,精原干细胞的保存和移植将为他们保存生殖能力提供了新的希望。目前精原干细胞的冻存已进入临床前阶段,由于人和小鼠睾丸解剖结构的不同,寻找一种适合人类睾丸生理和解剖的移植方法成为亟待解决的问题。方法:本研究使用本院2009-2011年尸体捐献者睾丸作为研究对象。在超声引导下将不同剂量(200×4,400×2,800×1μl)的混合显影剂(超声显影剂Microbubble+CT显影剂泛影葡胺+组织学染料Indian ink)经过附睾头,输精管,睾丸网及睾丸任意位置注入睾丸内。30分钟之后,使用显微CT对注射后的睾丸进行扫描,对获取的CT图像使用OsiriX医学图像处理软件进行三维重建以显示造影剂在睾丸内的分布情况。注射1小时后,睾丸组织被固定并行HE染色观察Indian ink在生精小管内的分布情况。收集和分析数据并进行统计学比较,以寻找最有效的移植方法。结果:在经睾丸网注射的睾丸中,超声明显监测到清晰的造影剂流动,而附睾头,输精管和任意位置注射的睾丸中没有发现。组织学方法在经睾丸网注射的睾丸输精小管中检测到Indian ink的存在,提示睾丸网可能是理想的精原干细胞移植注射途径。在不同剂量经睾丸网注射组中,CT结果提示睾丸内造影剂的分布并无显著性差异。考虑到多次穿刺对睾丸组织带来的损害,800μl单次注射将是比较理想的注射方法。结论:本实验的初步结果提示:在超声引导下经睾丸网单次注射(800μl)可能是具有临床使用价值的精原干细胞移植方法,移植后的细胞生理和组织学变化仍需要进一步的活体试验加以证明。