基于微流控芯片的免疫学技术检测EB病毒标志物的方法建立

来源 :第十四届全国免疫学学术大会论文摘要汇编 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong529
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EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)的早诊断能够降低患者发生重大疾病的风险,减少患者因患相关疾病而带来的痛苦和精神、经济负担。目前临床上常用的EBV抗体的检测方法存在检测时间长、试剂用量大、自动化程度不高、不适合在基层医疗机构推广等缺点。微流控(Microfluidics)技术具有高通量、检测试剂消耗少,污染少、自动分析全过程等优点。将微流控技术与磁免疫荧光分析原理结合,利用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)作为芯片原材料,经过激光切割及真空热压加工工艺制作成芯片。再将包被了抗原的磁珠及包被了抗人抗体的荧光微球快速冻干成小球嵌入芯片内。孵育、清洗后进行检测,通过图像分析得到平均荧光强度从而判断检测结果的阴阳性。通过精密度和特异性分析进行性能验证,并进一步通过与化学发光免疫分析法(Chemiluminescence i mmunoassay,CLIA)进行临床样本符合率测试从而判断芯片是否具有临床应用价值。结果表明,芯片通过精密度测试,各项目的变异系数(Coefficient of Variance,CV)均小于10%。芯片通过特异性测试,与多种常见的病原体抗体均无交叉反应。芯片经过55例临床样本测试,其中阳性样本25例,阴性样本30例。临床样本测试结果经过统计学分析后,结果显示该方法与临床上正在使用的CLIA法检测结果具有较好的一致性。综上所述,初步搭建了微流控检测平台,为临床提供一种快速、灵敏、简便、自动化程度高、易于基层推广的方法。
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