测定基因表达的新方法TaqMan PCR

来源 :中国科协第三届青年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lnln0923
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该文介绍了一种用ABI PRISM7700 Sequence Detector进行基因表达定量的新方法--TaqMan PCR。该方法利用DNA聚合酶的5′-核苷酸水解酶的活性。在PCR延伸过程中,将一个在其5′端标有“Peporter”(报告者)荧光,3′端标有“Quencher”(淬灭者)荧光的寡核苷酸探针水解,使“Reporter”荧光游离于“Quencher”荧光,7700 Sequence Detector System将真实地记录每一个PCR循环所释放的“Reporter”荧光,并将其与PCR循环数作图。运用此方法,他们测定了人类心肌腺苷酸环化酶的mRNA水平,发现β〈,1〉-肾上腺素受体阻滞剂并不影响腺苷酸环化酶第Ⅵ型的表达,提示该酶不参与人类心肌β-受体间交叉调节的机制。
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