自动片段分析的多重PCR检测儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病

来源 :中华医学会第十八次全国儿科学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pdswzjhxr
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目的:国际上检测儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)微小残留病(MRD)的方法主要是用多参数流式细胞术及实时定量PCR,但在发展中国家包括中国大部分地区尚无法开展该技术.既往用常规的定性PCR结合葡聚糖琼脂凝胶电泳方法不能完全排除非单克隆产物导致假阳性,用同源-异源二聚体分析或测序等方法虽然可以区分单克隆但操作繁琐,较简易的多重PCR联合自动片段分析检测儿童ALL微小残留病的可行性未见报道.方法:采用高效的1∶3匹配设计的病例-对照研究方法,收集2009年1月至2011年12月中山大学附属第一医院4例极早期复发的非高危儿童ALL(复发组)和危险度匹配的12例非高危儿童ALL(对照组)在初诊时、VDLD诱导化疗结束(距开始治疗5周,W5)、VALD再诱导化疗前(距开始治疗23周,W23)及维持第3个月(距开始治疗44周,W44)的骨髓样本,治疗方案均按照广东2008 ALL协作组方案进行.用多重PCR方法扩增各时间两组骨髓样本,PCR产物采用片段分析软件进行自动化分析是否存在IgH和(或)TCRγ基因单克隆重排.检出单克隆重排的IgH和(或)TCRy被认为是MRD阳性.结果:复发组4例和对照组12例ALL患儿在初诊时均监测到IgH单克隆重排,TCRγ单克隆重排阳性率56%.在W5,复发组MRD阳性者为50%,对照组为42%,两者差异无统计学意义;在W23、W44,复发组与对照组MRD的阳性率分别为75%与0%(P<0.01)、75%与8.3%(P<0.05).结论:作为一种能简便、可靠和特异地检测IgH/TCRγ基因单克隆重排的多重PCR联合自动片段分析方法,将其用于监测儿童ALL的MRD在我国有十分现实的意义,有必要增加病例数进一步研究.
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