【摘 要】
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目的:研究猪小肠粘膜下层(small intestinal submucosa,SIS)与雪旺细胞RSC96的生物相容性;通过复合RSC96细胞,使SIS负载RSC96细胞分泌的胞外基质和神经生长因子. 方法:将R
【机 构】
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四川大学华西医院干细胞与组织工程研究室,成都市高朋大道科园四路1号 610041
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目的:研究猪小肠粘膜下层(small intestinal submucosa,SIS)与雪旺细胞RSC96的生物相容性;通过复合RSC96细胞,使SIS负载RSC96细胞分泌的胞外基质和神经生长因子.
方法:将RSC96细胞与SIS复合培养,扫描电镜和HE染色检测RSC96在SIS上的生长、增殖情况.复合培养7天后用反复冻融结合0.25％SDS溶液洗涤的方法(以下简称:F-T/SDS法)脱去SIS上的RSC96细胞,联合DAPI染色、DNA凝胶电泳、PicoGreen DNA含量三种方法检测脱细胞效果,扫描电镜观察脱细胞后的材料支架上负载的胞外基质.
结果:扫描电镜和HE染色显示RSC96细胞在SIS上生长增殖状态好，呈三维生长;DAPI染色结果显示F-T/SDS法处理的SIS无细胞核的阳性染色，DNA凝胶电泳未见明显的条带，PicoGreen DNA定量显示F-T/SDS法处理的SIS DNA残留量仅为7.85±3.85) ng/mg干重，扫描电镜显示SIS支架材料上负载有RSC96细胞分泌的基质。
结论:RSC%与SIS复合生长良好，经过F-T/SDS法处理脱细胞彻底，并保留有细胞外基质成分。
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