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目的用供者异体淋巴细胞（HL）在受者荷瘤组织局部注射,以激发受者抗肿瘤免疫反应,再用受者自体淋巴细胞（AL）局部注射治疗肿瘤;比较用活HL与用灭活HL进行局部注射免疫的抗肿瘤效果。方法手术暴露受鼠（CB6F1小鼠）肝脏,用眼科镊刺入潜行分离出肝包膜和肝实质间隙,将肝细胞癌Hepa1-6（4×106/0.1mL）注射接种到肝实质内;用1mol/L NaOH将20g/L胶原溶液pH值调为7.4,立即注入瘤细胞接种点肝包膜下间隙,待胶原溶液在肝包膜下变成凝胶,形成一人工囊腔;将小鼠腹壁切口肌层缝合于两边皮下组织,使人工囊腔的肝包膜面贴在皮下,缝合皮肤关腹。此为荷瘤受鼠。CB6F1 H-2b/d小鼠和CC3HF1H-2d/k小鼠具有半相合MHC。接种瘤细胞3d后,取供鼠（CC3HF1小鼠）脾淋巴细胞（HL）,制成HL悬液（含HL 3×107/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL）和IHL悬液（用丝裂霉素灭活HL成为IHL,含IHL 3×107/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL）,再随机取荷瘤受鼠,在腹壁切口缝合处经皮穿刺进入人工囊腔,注入HL悬液、IHL悬液或PBS,分别为A组、B组、C组（均为每组0.2mL）。月桂氮卓酮可增加肝实质通透性,以利于淋巴细胞穿过。首次注射后6d各组同前法做第2次注射;注射后6d,从A、C组各随机取6只受鼠,其中2只用于计数CD8+T、NK细胞,测脾淋巴细胞杀瘤细胞率和血清IL-2、IFN-γ浓度;另外4只受鼠用于制备自体淋巴细胞（AL）悬液（含AL 9×107/0.2mL,月桂氮卓酮5mg/0.2mL）,将AL悬液经皮注射到A、B组剩下的受鼠肝包膜下人工囊腔内（每鼠0.2mL,各组n=8）;同时在C组受鼠人工囊腔内注射PBS（每鼠0.2mL,n=8）。末次注射后12d处死受鼠,剥出肿瘤测瘤的长径（a）和与之垂直的宽径（b）,计算肿瘤体积和抑瘤率。结果注射HL（或IHL）悬液后受鼠脾淋巴细胞杀瘤细胞率（效靶细胞比=60:1）比对照组高4.3倍,CD8+T、NK细胞数均比对照组明显增高（均为P<0.01）,血清IL-2、IFN-γ浓度分别比对照组高3.5倍和9.2倍。序贯注射HL（IHL）、AL治疗后,A组瘤体积[（1.15±0.23）cm3]、B组瘤体积[（1.28±0.35）cm3]分别明显小于C组瘤体积[（2.10±0.47）cm3]（均为P<0.01）。A组抑瘤率为45.2%,B组抑瘤率为39.1%（均以C组瘤体积为对照）,两组间比较无明显差异（P>0.05）。结论将HL（或IHL）注射到受者荷瘤肝实质表面可明显激发受者抗肿瘤免疫反应;用HL（或IHL）、AL序贯局部注射可有效抑制肿瘤生长;用HL悬液免疫的抗瘤效果比用IHL悬液免疫的抗瘤效果好,但差异不明显。