【摘 要】
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目的：建立SV40T胃壁细胞特异性表达转基因小鼠，为胃癌发病机制的研究提供动物模型。方法：将胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中的3.8kb H+/K+ATPase β promoter/SV40T基因片段 酶切回收，利用显微注射法制备转基因小鼠，PCR和Southern blotting 检测阳性转基因小鼠并建系繁殖，免疫组织化学检测基因的特异性表达。结果：将422枚经显微注
【机 构】
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郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，郑州 450052 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传
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目的：建立SV40T胃壁细胞特异性表达转基因小鼠，为胃癌发病机制的研究提供动物模型。
方法：将胃壁细胞特异性表达载体pcDNA3.1(-)/HKSV中的3.8kb H+/K+ATPase β promoter/SV40T基因片段 酶切回收，利用显微注射法制备转基因小鼠，PCR和Southern blotting 检测阳性转基因小鼠并建系繁殖，免疫组织化学检测基因的特异性表达。
结果：将422枚经显微注射后的受精卵移植到16 只假孕雌鼠输卵管，共生出77只仔鼠，移植成功率为18.2％(77/422)。在出生的77只仔鼠中，2 ＃、4 #、8 #、16 #、24 #、51 #、57 #、61 #、68 #、73 # 共10个品系经PCR检测为阳性首建鼠。除68 # 不育外，其他9个品系首建鼠共生出99只 F1代鼠，经PCR和Southern blotting 检测发现31只阳性鼠，阳性率为31.3％(31/99)。免疫组织化学检测 F1代阳性鼠均仅在胃组织中有SV40T基因的表达，而在心、肝、肾、肺、肠、骨骼肌、睾丸等组织器官中均不表达。
结论：建立了胃壁细胞特异性表达SV40T基因转基因小鼠动物模型。
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