论文部分内容阅读
目的 探讨miR-218在甲状腺癌中的表达,生物学功能及相关分子机制.方法 荧光定量PCR检测miR-218在3例正常甲状腺组织、12例滤泡状癌、25例乳头状癌及10例未分化癌中的表达情况.Transwell侵袭实验及划痕实验检测miR-218高表达对甲状腺癌细胞WRO及SW579侵袭能力的影响.细胞增殖实验(MTT)、Edu及细胞克隆形成实验检测miR-218高表达对WRO及SW579细胞增殖能力的影响.在线软件预测miR-218可能调控的靶基因.免疫印迹及报告基因实验检测miR-218对靶基因PDGFRA及PLCG1的调控作用.结果 相对于正常甲状腺组织,miR-218在12例滤泡状癌、25例乳头状癌及10例未分化癌中的表达均明显下降,但miR-218在滤泡状癌、乳头状癌及未分化癌中的表达无明显区别.侵袭实验及划痕实验的结果表明miR-218高表达可以使甲状腺癌细胞株WRO及SW579的侵袭力和运动能力下降,与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05).MTT实验结果表明miR-218高表达明显抑制细胞增殖(P＜0.05).Edu实验表明miR-218高表达对细胞增殖的抑制率约为20％,与对照组比较差异均有显著性(P＜0.05).在线软件TargetScan预测PDGFRA及PLCG1是miR-218可能调控的靶基因.免疫印迹结果表明miR-218高表达显著下调PDGFRA及PLCG1的蛋白表达水平.荧光定量PCR结果表明miR-218高表达对PDGFRA及PLCG1的mRNA表达水平无明显改变.双荧光素酶报告系统结果表明miR-218对PDGFRA及PLCG1表达水平的调控是通过与各自的3-UTR上预测结合位点结合.结论 miR-218在甲状腺癌中表达明显下调,miR-218通过调控靶基因PDGFRA及PLCG1来影响甲状腺癌细胞的侵袭及增殖.