骨形态发生蛋白-7抑制染石英尘大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞上皮间质转化的作用及机制

来源 :中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:heinblue
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  [目的]观察骨形态发生蛋白-7(BMP-7)对石英诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN)上皮间质转化(EMT)的作用及转录因子Snail、Slug、ZEB-1、ZEB-2、Twist及p38MAPK蛋白表达的影响,以探讨BMP-7抑制EMT的可能机制.[材料和方法]采用慢病毒转染的方式对RLE-6TN进行BMP-7基因沉默和过表达.倒置相差显微镜及透射电镜观察RLE-6TN细胞形态和超微结构的改变.Western blot方法检测各组RLE-6TN中上皮标志物(E-cadherin)、间质标志物(α-SMA、Vimentin),转录因子,磷酸化及非磷酸化p38MAPK的蛋白表达.[结果]加入石英刺激后,细胞由椭圆形贴壁生长变为长梭形,胞体拉长,成熟板层小体数量明显减少;Western blot结果显示石英作用下,上皮细胞标志物E-cadherin蛋白表达下调,而间质细胞标志物α-SMA、Vimentin,转录因子Snail、Slug、ZEB-1、ZEB-2、Twist及磷酸化p38MAPK蛋白表达上调,非磷酸化p38MAPK无明显变化,表明石英能诱导RLE-6TN发生EMT及激活p38MAPK/转录因子通路.BMP-7沉默组加入石英刺激后,上皮细胞标志物E-cadherin较空病毒+石英组蛋白表达下调,而间质细胞标志物α-SMA、Vimentin,转录因子Snail、Slug、ZEB-1、ZEB-2、Twist及磷酸化p38MAPK蛋白表达上调,非磷酸化p38MAPK无明显变化,表明沉默BMP-7能促进石英诱导RLE-6TN发生EMT及促进p38MAPK/转录因子通路的激活.BMP-7过表达组加入石英刺激后,上皮细胞标志物E-cadherin较空病毒+石英组蛋白表达上调,间质细胞标志物α-SMA、Vimentin,转录因子Snail、Slug、ZEB-1、ZEB-2、Twist及磷酸化p38MAPK蛋白表达下调,非磷酸化p38MAPK无明显变化,表明过表达BMP-7能抑制石英诱导RLE-6TN发生EMT及抑制p38MAPK/转录因子通路的激活.[结论]骨形态发生蛋白-7可能通过抑制p38MAPK/转录因子通路抑制染石英尘RLE-6TN细胞发生EMT.
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