【摘 要】
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鳞头犬牙南极鱼卵壳蛋白(zona pellucida, ZP)在长期低温环境下肽链长度发生了缩短的进化趋势,为探究肽链缩短所发生的生物学意义,本实验研究了ZP蛋白对于中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)在低温下的存活率,从南极鱼卵巢中提取RNA并反转成cDNA克隆到表达载体PIRES2-EGFP,共构建了三种ZPC5质粒,并将质粒分别转染至CHO细胞中进行表达,低
【机 构】
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上海海洋大学水产与生命学院水产种质资源发掘与利用省部共建教育部重点实验室,上海201306
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鳞头犬牙南极鱼卵壳蛋白(zona pellucida, ZP)在长期低温环境下肽链长度发生了缩短的进化趋势,为探究肽链缩短所发生的生物学意义,本实验研究了ZP蛋白对于中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary,CHO)在低温下的存活率,从南极鱼卵巢中提取RNA并反转成cDNA克隆到表达载体PIRES2-EGFP,共构建了三种ZPC5质粒,并将质粒分别转染至CHO细胞中进行表达,低温处理后,采用流式细胞术对细胞的存活率进行测定。结果 表明,鳞头犬牙南极鱼ZPC5基因在中国仓鼠卵巢细胞中高效表达,低温处理后,肽链长度较短的ZPC5基因的CHO细胞存活率越高,与未经低温处理的CHO细胞相比,目的蛋白表达量也明显增多。研究表明,南极鱼在进化过程中,一些鱼类的ZPC5基因在低温下具有提高细胞抵抗低温的功能,且在进化过程中发生了正选择。
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东北七鳃鳗(Lampetra morii)是现存最古老的无颌类脊椎动物之一,对其免疫系统的研究在理论上有着重要的进化意义.白细胞介素-8 (Interleukin8,IL-8)是一种趋化因子,研究发现IL-8能促进炎性反应进程、刺激血管的发生、调节宿主免疫功能等.为了研究东北七鳃鳗IL-8的功能,先扩增出IL-8基因,然后利用pColdI载体在E.coli BL21中进行表达,之后使用镍柱进行蛋白
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建立模式生物斑马鱼胚胎进行化学品毒性鉴定的方法.方法将健康的亲代成熟斑马鱼进行交配产卵，产卵后收集斑马鱼胚胎，于6hpf将斑马鱼胚胎暴露于梯度浓度的甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇，在暴露后120 h内，观察斑马鱼胚胎的发育状况.结果 甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇暴露后，随着剂量的升高，斑马鱼胚胎在各观察时间点出现死亡或不发育的现象，甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇对斑马鱼胚胎的96 h LD50分
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