【摘 要】
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针对猪Th1型细胞因子IL-2、IL-12p40、IFN-γ以及管家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-2、IL-12p40、IFN-γ及β-actin的SYBR Green I teal-timePCR方法。该方法线性关系好,标准曲线的相关系数均达到0.997以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×10拷贝/μ
【机 构】
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广西动物疫病预防控制中心,广西 南宁 530001 广西大学动物科学技术学院,广西 南宁 5300
【出 处】
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广西畜牧兽医学会养猪学分会2009年年会
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针对猪Th1型细胞因子IL-2、IL-12p40、IFN-γ以及管家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测IL-2、IL-12p40、IFN-γ及β-actin的SYBR Green I teal-timePCR方法。该方法线性关系好,标准曲线的相关系数均达到0.997以上;敏感性高,初始模板的检出下限均达到1×10拷贝/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3.5%。
应用所建立的方法对猪繁殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血单个核细胞中IL-2、IL-12p40和IFN-γ mRNA的表达水平进行检测。结果表明,所建立的real-timePCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于猪Th1型细胞因子的检测及定量分析。
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为研究不同能量、粗蛋白、钙和磷水平对育肥期新美系杜洛克原种猪生产性能及血液生化指标的影响,确定70~90Kg新美系杜洛克在日粮中这4种养分的适宜含量,试验选择胎次、断奶日龄及年龄基本相近的体重为65±2kg健康新美系杜洛克原种猪36头,采用4因素3水平的L9(34)正交试验设计。试验结果表明:①日粮能量、粗蛋白和钙水平对生长性能影响差异均不显著(p>0.05),磷水平对日采食量的影响显著(p0.0
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