【摘 要】
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自交不亲和性状是影响沙田柚产量的重要因素,然而,关于沙田柚自交不亲和遗传机制至今不明,特别是关于其控制自交不亲和性状的两个关键决定因子,雌、雄蕊决定因子仍未被克隆。
【机 构】
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华中农业大学园艺植物生物学教育部重点实验室,国家柑橘育种中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31301760)
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自交不亲和性状是影响沙田柚产量的重要因素,然而,关于沙田柚自交不亲和遗传机制至今不明,特别是关于其控制自交不亲和性状的两个关键决定因子,雌、雄蕊决定因子仍未被克隆。试验室前期研究发现并鉴定了1个沙田柚亲和突变体植株。本研究中利用比较蛋白质组学技术,详细比较沙田柚亲和突变体材料与沙田柚自交不亲和材料的成熟花粉与花柱蛋白表达谱,进而利用MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白,从中选出候选差异基因,进而为研究沙田柚自交不亲和机理提供依据。取沙田柚亲和突变体材料与沙田柚自交不亲和材料的成熟花粉与花柱用于分析。经MALDI-TOF-TOF质谱分析,最终共获得188个有效差异蛋白点,其中花柱差异蛋白点116个,花粉差异蛋白点72个。将鉴定到的差异蛋白经NCBI数据库比对,结果表明其中并未包含与控制蔷薇科等配子体自交不亲和相关的S-RNase蛋白,反而鉴定到多个与十字花科自交不亲和相关蛋白,即S位点受体激酶蛋白(S-locus receptor kinase,SRK)存在。随即利用甜橙基因组数据对SRK基因进行全基因组水平分析,发现甜橙中共包含112个SRK家族成员,分布在甜橙9条染色体中;其中SRK21与对应差异蛋白分子量一致。利用RT-PCR技术对SRK21基因在沙田柚花器官不同组织表达进行分析,发现该基因具有花柱特异表达特性;qRT-PCR进一步分析发现SRK21基因在亲和突变植株成熟花柱中不表达,而在不亲和植株成熟花柱中特异高表达,暗示该基因可能参与沙田柚自交不亲和反应。本研究中获得的SRK21蛋白信息为进一步深入研究沙田柚自交不亲和机制提供了重要线索。
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