利用噬菌体展示技术筛选猪圆环病毒2 Cap蛋白的线性B细胞表位

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衣壳蛋白(Cap)是圆环病毒2的唯一结构蛋白,因其良好的抗原保护性,成为疫苗研究的主要对象。为了寻找一种快速且简单的方法来确定Cap蛋白的抗原表位,我们以亲和层析纯化的Cap蛋白特异性多克隆抗体为靶分子,利用噬菌体随机7肽库对其进行线性B细胞表位的筛选。经过3轮的筛选之后,对20个与Cap蛋白特异性抗体具有结合能力的噬菌体进行了测序,并通过与Cap蛋白的氨基酸比对分析及ELISA的验证试验,推导出8个核心区域(50SRTFGYT56,62VRTPSW67,68AVDMMR73,79FLPPG84,86SNPRSVPF93,102KVEFWP107,119GSSXXXLDD127和229PPLNP233)是Cap蛋白的线性B细胞表位,并且其中50SRTFGYT56、86SNPRSVPF93和103KVEFWP107为新发现的表位。将含模拟表位的9株噬菌体免疫小鼠,结果除2株之外,其它的7株都能够诱导产生针对Cap蛋白的体液免疫应答。
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