抑制变异链球菌及其生物膜形成的靶向抗菌肽的设计、抗菌活性及机制研究

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目的:本研究旨在合成抗致龋齿菌变异链球菌(Streptococcus mutans,S.mutans)的抗菌药物,并研究其对变异链球菌早期生物膜生长抑制及成熟生物膜的清除作用。方法:采用抗菌域与靶向域结合的方法设计靶向抗菌肽,利用最小抑菌浓度(MIC)和最小生物膜抑制浓度(MBIC50)来评价其对变异链球菌及其生物膜活性抑制的作用。同时,时间-杀菌效率(Time-killing)实验测定靶向抗菌肽对口腔变异链球菌的短期杀菌效果。此外,利用共聚焦显微镜检测靶向肽对成熟生物膜上细菌的杀菌效果。流式细胞仪及荧光酶标仪检测靶向肽的抗菌作用机制。结果:实验证明靶向肽PGKFP是抗S.mutans及其生物膜活性最高的多肽,最小抑菌浓度为3.1μM,最小生物膜抑制浓度为5.27±0.08μM。靶向肽通过破坏细菌膜的完整性从而导致细菌的死亡。此外,12.5μM的PGK-FP在第10分钟可将细菌全部杀死,具有极高的杀菌效率。共聚焦显微镜结果表明,6.25μM的PGKFP作用于生物膜,在第30分钟时将生物膜上的全部活菌杀灭。结论:本研究表明靶向肽是具有抗变异链球菌及其生物膜活性的多肽,且具有极高的杀菌效率因此在龋齿的预防和治疗中具有潜在的应用价值。
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