基于PCR array技术研究丹参酮ⅡA对高脂血症大鼠肝脏自噬相关基因的影响

来源 :中国生物化学与分子生物学会中医药生物化学与分子生物学分会2017学术年会暨第八届理事会第四次会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crosslightning
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  目的:应用PCR array 技术揭示丹参酮ⅡA 对高脂血症大鼠肝脏自噬相关基因表达的影响,从自噬角度探讨丹参酮Ⅱ改善脂质代谢的作用机制.方法:30 只SPF 级,健康雄性SD 大鼠随机分为空白组、高脂组和治疗组.空白组每日给予普通大鼠饲料喂食.高脂组、治疗组予高脂饲料喂养.造模4 周后,治疗组予丹参酮ⅡA 磺酸钠10mg/kg(体重,下同)d 腹腔注射;空白组、高脂组予等体积生理盐水腹腔注射,同时3 组大鼠饲料分别同前.用药8 周后进行模型评估,检测大鼠血脂情况以及肝脏组织形态学变化.应用PCR array 技术检测大鼠肝脏自噬通路相关基因mRNA 表达,用western blot 方法检测LC3A/B 表达量及验证部分差异基因的表达趋势.结果:与空白组相比,高脂组大鼠血清TG、TC 和LDL-C 水平显著升高(P<0.05 or P<0.01),HDL-C水平降低(P<0.05);与高脂组相比,治疗组TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平均无明显改变(P>0.05).形态学结果显示,与高脂组相比,治疗组大鼠肝脏脂肪空泡与脂质沉积减少.Western blot 结果显示,高脂组LC3A/B 表达量降低,治疗组发生逆转.PCR array 技术分析发现:在模型组下调的Atg3、Atg4b、Atg7、beclin-1 及ULK15 个基因在治疗组表达上调,western blot 验证结果显示,Atg3、Atg7 蛋白变化趋势与PCR array 结果相一致,Atg4b 在治疗后表达量无明显改变.结论:丹参酮ⅡA 可促进自噬小体的形成提高自噬水平,这可能是其减少高脂血症大鼠肝脏脂质沉积的机制之一.
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