【摘 要】
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利用PCR技术从带有伪狂犬病毒(PRV)gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304 bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针.特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRV Bartha-k61株疫苗毒DNA.猪细小病毒(PPV)DNA、猪圆环病毒(PCV)DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)cDNA、猪瘟病毒(CSFV)cDNA的杂
【机 构】
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青岛农业大学动物科技学院,青岛 266109
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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利用PCR技术从带有伪狂犬病毒(PRV)gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304 bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针.特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRV Bartha-k61株疫苗毒DNA.猪细小病毒(PPV)DNA、猪圆环病毒(PCV)DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)cDNA、猪瘟病毒(CSFV)cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果袁明,谊探针对PRV野毒的最低检出量为4pg.应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断.
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本研究扩增了A组猪轮状病毒标准株OSU株非结构蛋白基因NSP4,构建了重组质粒pMD-19T-NSP4,经过序列分析该基因与报道的OSU株核苷酸序列同源性为81%,氨基酸同源性为83%,主要变异区段集中在C末端.该毒株更趋向于人轮状病毒,它与人轮状病毒R293株核苷酸同源性为93%,与氨基酸序列同源性为95%.另外,还构建了重组质粒pEGFP-N1-NSP4,将其转染至COS7细胞,发现pEGFP
副粘病毒可以引起一系列猪病,给养猪业带来了重大损失,同样给人类带来的严重的威胁.国内关于猪副粘病毒病的最早报告是在2000年,本实验室于2006年在发病猪体内分离出一病毒,后经分子鉴定属于副粘病毒,为禽副粘病毒Ⅰ型(APMV-1),并对其进行了生物学特性分析.
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