恰塔努加链霉菌中聚酮合酶辅基化网络的研究

来源 :第四届全国微生物基因组学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tony_tang
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  许多由聚酮合酶(PKS)合成的微生物次级代谢产物被应用于药物、农药和食品添加剂领域,磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(PPTase)负责催化PKS中酰基载体蛋白(ACP)的辅基化,即转移辅酶A中的磷酸泛酰巯基乙胺基到ACP上。
  纳他霉素是一种多烯大环内醋类抗真菌抗生素,工业菌株恰塔努加链霉菌L10的基因组中除了负责合成纳他霉素的scn PKS以外,还含有簇(scm PKS, PKSⅠa. scw PKS和PKSⅡc),以及2个PPTasePKS基因(SchPPr和SchACPS)。体外生化表征结果表明:SchPPT可以催化scn PKS、scmPKS、PKSⅠa, scw PKS和PKSⅡc,SchACPS可以催化scw PKS, PKSⅡc和脂肪酸合酶(FAS);缺失掉SchPPT的N-端或者突变掉镁离子结合位点(D105和EI07)都导致SchPPT活性的丧失;将SchPPT的N-端融合到SchACPS上没有改变SchACPS对ACP底物的选择性。体内实验结果表明:SchPPT敲除株不能生产纳他霉素但是仍然可以生产抱子色素。综上所述:SchPPT对类型ⅠPKS和类型ⅡPKS的都有选择性,SchACPS对类型ⅡPKS和FAS具有选择性;2)SchPPT的N-端和镁离子结合位点都对SchPPT的活性至关重要;3) SchPPT的C-端可能决定了SchPPT的底物选择性。
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