【摘 要】
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本实验采用来源于南宁市屠宰场收集的猪卵巢的卵母细胞，于25350C生理盐水送至实验室，用带有18G针头的注射器抽取卵泡直径为3～6mm的卵泡，经沉淀后收集有3层颗粒细胞包被的卵丘卵母
【机 构】
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广西大学亚热带生物资源保护利用国家重点实验室
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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本实验采用来源于南宁市屠宰场收集的猪卵巢的卵母细胞，于25350C生理盐水送至实验室，用带有18G针头的注射器抽取卵泡直径为3～6mm的卵泡，经沉淀后收集有3层颗粒细胞包被的卵丘卵母细胞复合体，于成熟液中经体外成熟42-44h后，收集有第一极体的成熟卵母细胞用于实验。供体细胞选用两周龄广西纯种德保黑猪第5～8代耳成纤维细胞。本实验采用四组对照实验不同浓度的5-Aza-CdR处理广西纯种德保黑猪耳成纤维细胞(72h)，观察记录其生长曲线变化情况，并用四组处理后成纤维细胞作为供体与去核猪卵母细胞融合进行手工克隆，记录其对后期胚胎发育率、囊胚细胞数和DNA甲基化程度的影响。研究表明：高浓度5-Aza-CdR对德保黑猪成纤维细胞具有抑制作用。2,3,4组相对于1组均有不同程度的畸变、生长抑制甚至致死。用处理后成纤维细胞作供体，猪手工克隆重构胚体外发育的卵裂率(24h.48h)和桑堪胚率各组间差异不显著(P>0.05)。
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