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<正>采集安徽固镇感染马铃薯 Y 病毒(PVY)的烟草病样,Trizol 法提取总 RNA,根据 PVY HC-Pro 基因两侧的保守序列设计嵌套引物 HC/F1、HC/R1和 HC/F、HC/R,以 HC/R1为引物,M-MLV 逆转录得 cDNA 第一链,Nest-PCR 扩增得一特异性条带,克隆至 pMD18-T 载体,转化大肠杆菌 TG1,筛选阳性克隆并测