番茄中独脚金内酯合成关键基因CCD7、CCD8 RNA沉默载体的构建

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根寄生性种子植物列当对番茄产量和品质造成了严重的影响。独脚金内酯是刺激列当种子萌发的必要条件,而CCD7和CCD8基因是独脚金内酯脂合成途径中的关键基因。因此,我们利用RNAi技术获取抗列当的番茄植株,针对CCD7和CCD8基因构建RNA沉默载体。根据已上传的番茄CCD7和CCD8基因的核苷酸序列设计特异性引物,扩增到目的CCD7和CCD8基因的片段;然后通过特定酶切将2个基因进行连接,获得长度为800bp的融合基因CCD7-8。融合基因以反向重复的方式连入pUCCRNAi载体,并定向插入到p35-1上,构建了含CCD7和CCD8基因的植物表达载体p35-1-CCD7-8。
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