【摘 要】
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为了进一步研究 A 型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用。本研究采用 RT-PCR 技术分别扩增 A/Swine/Guangdong/LM2/05(H1N1)、A/Chicken/Guangdong/W2/04(H5N1)流感病毒的
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室兽医生物技术国家重点实验室; 辽宁省动物疫病预防控制中心; 莱阳市城厢兽医站; 黑龙江农垦总局畜牧兽医总站哈尔滨
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为了进一步研究 A 型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用。本研究采用 RT-PCR 技术分别扩增 A/Swine/Guangdong/LM2/05(H1N1)、A/Chicken/Guangdong/W2/04(H5N1)流感病毒的 NP 基因,分别将其克隆到原核表达载体 pET30(a)上,在大肠杆菌中进行诱导表达。SDS-PAGE 和 Western-Blotting 检测表明：H1N1亚型猪流感病毒 NP 蛋白得到表达,并且能分别与 H1N1和 H5N1亚型流感病毒的鼠高免血清发生特异性反应,具有良好的反应活性；而 H5N1亚型禽流感病毒的重组 NP 蛋白未获得表达。结论为以 NP 蛋白为诊断抗原的诊断试剂的开发、ELISA 诊断方法的建立、及蛋白功能的研究奠定了基础；本结果同时说明不同毒株的 NP 蛋白在大肠杆菌中的表达具有一定差异性。
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