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背景:阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种罕见的获得性造血干细胞疾病,是一种或几种造血干细胞发生PIG-A基因突变,导致血细胞表面糖基磷脂酰肌醇(GPI)合成障碍,补体活化异常,从而引起持续性血管内溶血,全血细胞减少,甚至骨髓衰竭,常伴有血红蛋白尿、栓塞。流式细胞仪检测患者外周血红细胞、粒细胞表面锚连蛋白CD55、CD59的缺失率已成为诊断PNH的首选实验方法。然而,越来越多的研究表明传统的流式检测方案对PNH诊断存在一定的局限性。荧光标记气单胞菌溶素前体变异体(FLAER)可特异地结合于有核细胞上的GPI锚蛋白,可通过流式细胞仪进行检测,区分GPI~+和GPI~-细胞。FLAER作用于所有的GPI锚蛋白,不会因不同细胞表达GPI蛋白种类和多少的不同而造成误差,因而这种针对GPI锚蛋白进行检测的方法理论上是诊断PNH更敏感、更特异的方法。多项研究表明,在正常人群外周血细胞中亦存在微小的PNH克隆。而一些再生障碍性贫血(AA)及骨髓增生异常综合征(MDS)患者在疾病进展过程中,也会有少量PNH克隆的发生,具有此特征的患者治疗及预后与无PNH克隆的患者不同。因此,观察本地区正常人群中外周血PNH克隆数,并据此建立适用于本实验室的cutoff值对于辨别AA、MDS患者与正常人群PNH克隆,指导疾病治疗、预测疾病转归具有重要意义。目的:探索FLAER多参数检测外周血粒细胞、单核细胞PNH克隆的方案,并初步建立适用于本实验室条件下的新方案的cutoff值。方法:收集贵州医科大学附属医院体检健康成人全血标本,应用流式细胞仪,探索FLAER多参数检测PNH的新方案,并与传统的CD55、CD59检测方法进行比较,同时观察存在于健康成年人的外周血细胞的PNH克隆数,初步建立适用于本实验室的cutoff值。结果:成功建立了PNH的FLAER多参数检测新方案,与传统的CD55、CD59相比,其结果更加清晰、准确、直观,比传统方法更敏感、更特异。应用新方案观察到在成年人中亦存在微小的PNH克隆,其分布规律符合Poisson分布,并根据Poisson分布计算出新方案的cutoff值。结论:新方案检测PNH比传统方法的灵敏度和特异性更高,结果易于判断,在PNH的早期诊断、AA和MDS病程监测及预后判断中具有广泛的应用前景。