【摘 要】
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灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种真菌性植物病原菌,能侵染超过200种作物。目前,苯并咪唑类杀菌剂(MBC)是防治灰葡萄孢的常用杀菌剂种类之一。研究表明,β微管蛋白的点突变与此类杀菌剂的抗药性有关,常见的点突变为β微管蛋白的第198位密码子由谷氨酸突变为丙氨酸(E198A)、缬氨酸(E198V)和赖氨酸(E198K)。基于环介导等温扩增技术(LAMP),本研究建立了一种快速检测灰葡
【机 构】
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华中农业大学植物科技学院,武汉430070 华中农业大学植物科技学院,武汉430070;湖北省作物
【出 处】
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第十一届中国植物病害化学防治学术研讨会
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灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种真菌性植物病原菌,能侵染超过200种作物。目前,苯并咪唑类杀菌剂(MBC)是防治灰葡萄孢的常用杀菌剂种类之一。研究表明,β微管蛋白的点突变与此类杀菌剂的抗药性有关,常见的点突变为β微管蛋白的第198位密码子由谷氨酸突变为丙氨酸(E198A)、缬氨酸(E198V)和赖氨酸(E198K)。基于环介导等温扩增技术(LAMP),本研究建立了一种快速检测灰葡萄孢对苯并咪唑类杀菌剂抗药性的方法。针对三种点突变,该方法设计了三组特异性引物,每组引物均能够特异性扩增含有其相应点突变的DNA模板,但却不能扩增含有其他点突变或野生型的DNA模板。为提高反应效率,本研究优化了反应体系和条件。特异性研究表明,该方法只能特异性扩增灰葡萄孢的DNA模板,说明其有很好的特异性。此外,该方法还具有很好的灵敏度和重复性。值得一提的是,经沸水处理的菌丝悬浮液可以作为DNA模板直接用于抗药性的检测。这不仅简化了操作,提高了效率,而且降低了技术门槛。鉴于其快速、简便、高效等特点,本检测技术是一种很有潜力的检测灰葡萄孢对苯并咪唑类杀菌剂抗药性的方法。另外,由于其不需要复杂的仪器设备,此检测技术还有望在田间和偏远地区灰葡萄孢对苯并咪唑类杀菌剂的抗药性监测中发挥重要作用。
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