【摘 要】
：
目的 应用蛋白质组学方法鉴定弓形虫表面和分泌蛋白,评价分离蛋白的抗原性,研究弓形虫表面和分泌蛋白与宿主组分的相互作用.方法 采用生物素标记、亲和素层析分离、液相色谱-两级质谱联用技术(LC-MS/MS)鉴定弓形虫速殖子表面和分泌蛋白;采用细胞因子抗体芯片和基因芯片技术评价分离蛋白激活宿主免疫细胞的能力;原核重组表达部分鉴定蛋白,采用Western-blot比较不同蛋白的抗原性;采用GST Pull
【机 构】
：
首都医科大学附属北京友谊医院北京热带医学研究所;热带病防治研究北京市重点实验室 首都医科大学附属北
【出 处】
：
中华医学会第六次全国艾滋病、病毒性丙型肝炎暨全国热带病学术会议
论文部分内容阅读
目的 应用蛋白质组学方法鉴定弓形虫表面和分泌蛋白,评价分离蛋白的抗原性,研究弓形虫表面和分泌蛋白与宿主组分的相互作用.方法 采用生物素标记、亲和素层析分离、液相色谱-两级质谱联用技术(LC-MS/MS)鉴定弓形虫速殖子表面和分泌蛋白;采用细胞因子抗体芯片和基因芯片技术评价分离蛋白激活宿主免疫细胞的能力;原核重组表达部分鉴定蛋白,采用Western-blot比较不同蛋白的抗原性;采用GST Pull-down技术鉴定与弓形虫表面和分泌蛋白互作的宿主组分,并采用过表达或RNAi技术研究蛋白互作与感染免疫的关系.结果 本研究共鉴定785个弓形虫表面和分离蛋白.分离蛋白刺激宿主巨噬细胞分泌的细胞因子水平显著高于弓形虫速殖子感染,且基因表达谱功能聚类与致病性大肠杆菌(EPEC)感染近似.重组蛋白与人源弓形虫患者血清免疫杂交表明部分鉴定蛋白抗原性较高.弓形虫多个ROP和GRA分泌蛋白与宿主碳酸代谢酶类和tRNA转甲基酶类有显著蛋白互作,且免疫细胞碳酸酐酶过表达显著提高弓形虫繁殖速度.结论 弓形虫速殖子阶段表达的表面和分泌蛋白虽然少于基因组预测结果,但整体抗原性较高,可显著激活宿主固有免疫反应.宿主碳酸代谢酶类被弓形虫分泌蛋白捕获后直接或间接参与弓形虫的细胞内繁殖过程,可能与纳虫泡的形成和稳定性有关.
其他文献
本文针对起重机驾驶培训存在的高成本、高风险等问题,利用虚拟仿真技术建立起重机虚拟驾驶培训系统。该系统采用起重机真实的车辆动力、模型数据,借助沉浸式3D投影技术和六自由度运动平台,可使参培人员从视觉和体感上的真实感受起重机的驾驶与操控,能使其熟练掌握起重机行驶中转向模式、悬架调节等各项复杂技术,并对其操作自动评价,提出改进建议。
艾滋病在中国流行的形势妇女儿童艾滋病感染状况·2005年底,我国15岁以下儿童感染HIV共计2386例,大部分集中在河南、云南等省的局部高流行地区·某省调查了4个高发乡的991名儿童,感染HIV 31名,儿童HIV感染率为3.13％·在云南、新疆、河南等省的一些艾滋病高流行区,高危人群HIV感染率超过5％,个别地区孕产妇HIV感染率达到3％.·全国艾滋病疫情库数据显示,我国女性HIV感染者比例明显
目的 本研究观察以非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI)为基础的一线高效抗逆转录病毒治疗(HAART)失败的HIV/AIDS患者更换为以蛋白酶抑制剂(PI)为基础的二线HAART后对体内免疫活化的影响.方法 收集以NNRTI为基础的一线HAART失败后的患者共30例,更换为以PI为基础的二线HAART方案,对患者进行0、12、24、36、48周的队列随访研究.检测患者血浆病毒载量和外周血CD4+T细
目的 探讨初始抗逆转录病毒治疗(ART)方案对长期治疗依从性佳的HIV感染者免疫功能重建的影响.方法 建立回顾性研究队列,纳入2000年至2013年间北京协和医院感染科门诊长期随访(年限大于2年)、接受ART且依从性＞95％的HIV感染者.根据初启动ART方案对患者进行子队列分组:齐多夫定组(AZT)、司他夫定组(D4T)、去羟肌苷组(DDI)、蛋白酶抑制剂组(PI)),分析病例随访过程中总体CD
设计一种分装机的粘性物料计量入料装置,通过调节装置标定计量值,通过抹平装置将多余的物料去除,通过怼塞装置将物料完全下怼至包装袋中。该装置调节方便、快捷,粘性物料填充效率高、计量精准,解决了现有分装机分装粘性物料过程中,物料残留的问题,达到精准计量目的。
In about 50％ of the patients infected with subtype B HIV-1, the emergence of an HIV-1 using CXCR4 as co-receptor (X4-or dual-usage) seems to be associated with accelerated disease progression.It is no
住宅小区安防系统能够保证小区内部安全,因此应该对其设计过程加以重视。本文对小区安防系统的周界防越报警系统、视频监控系统等进行了探讨,希望能够对住宅小区安防设计起到一定的作用。
目的 从预测的日本血吸虫分泌蛋白中,筛选能被患者血清识别的抗原,并用于血吸虫病的免疫诊断.方法 利用SingnalP软件,预测带有信号肽的血吸虫分泌蛋白(Sj SP),并将其克隆到GST融合表达载体,制备重组蛋白;利用GST与GSH亲和结合的性质,将GST融合蛋白特异吸附到螯合GSH的96孔微孔板上;通过化学发光ELISA法,在微孔板上筛选能和血吸虫病患者血清IgG反应的抗原;扩大血清样本,从阳性
目的 探讨急性HIV-1感染中病毒嗜性对疾病进展的影响以及在HIV感染最初一年中病毒嗜性的变化.方法 12例急性HIV-1感染者来源于首都医科大学附属北京佑安医院男男性接触者(MSM)高危人群队列,其中7例病情进展较快(感染HIV 2年后CD4 +T细胞计数＜200个/μ1),5例进展较慢(感染HIV 2年后CD4 +T细胞计数仍＞500个/μl).留取患者第一次HIV阳性随访点和48周随访点血浆
目的 HIV病毒株的耐药已经对中国HIV防治工作构成了巨大挑战,随着我国开始扩大和普及免费抗逆转录病毒治疗的范围,HIV患者的原发耐药现象逐年增加.我们利用病毒突变株同源/非同源突变比(ka/ks)的方法对HIV病毒在不同时间和空间中受到的进化选择压力进行定量评估.并对HIV病毒pol序列Ka/Ks比值的变化与我国不同地区卫生政策之间的关系进行相关分析,将Ka/Ks测试和地理信息系统相结合,建立根