【摘 要】
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目的 利用胚胎干细胞衍生的肝组织富含血窦,库普弗细胞遇到生物或化学刺激,可分泌炎性细胞因子白介素-6(IL-6),制备炎性模型。并探索炎性恶变的网络调控分子事件与信号通路。方法与结果 (1)胚胎干细胞定向分化至第1 8天,以白蛋白(AIB)阳染细胞为分化成熟的肝细胞,PECAM-1阳染细胞为分化成熟的血管内皮细胞,据此确定胚胎干细胞衍生肝组织体外实验体系制备成功。(2)胚胎干细胞分化初期,加入一定
【机 构】
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浙江大学药学院心脑血管与肝脏药理研究室,浙江杭州310058 浙江大学,浙江杭州310058
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目的 利用胚胎干细胞衍生的肝组织富含血窦,库普弗细胞遇到生物或化学刺激,可分泌炎性细胞因子白介素-6(IL-6),制备炎性模型。并探索炎性恶变的网络调控分子事件与信号通路。方法与结果 (1)胚胎干细胞定向分化至第1 8天,以白蛋白(AIB)阳染细胞为分化成熟的肝细胞,PECAM-1阳染细胞为分化成熟的血管内皮细胞,据此确定胚胎干细胞衍生肝组织体外实验体系制备成功。(2)胚胎干细胞分化初期,加入一定浓度范围的马兜铃酸Ⅰ (AAI)共培养,至分化第18天时,与DMSO组相比,免疫荧光成像确定血窦库普弗细胞被IL-6阳染,同时大量IL-6弥漫浸润在肝细胞周围,据此确定IL-6分泌炎性模型建立。(3)上述炎性模型分别用炎性恶变开关分子免疫荧光染色与AIB阳染共叠加,作为炎症恶性转变信号通路特异分子事件,并以甲胎蛋白(AFP)表达为恶变指标。与DMSO组相比,AAI组研究体系出现下述肝组织炎性恶变网络调控现象："IL-6分泌上调→多个恶变开关分子上调→AFP上调"。结论 构建胚胎干细胞衍生肝组织IL-6炎性模型,可用于初步评价化学物质致炎恶性转变；AAI处理后,出现炎性恶变的网络调控分子事件与信号通路。
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