【摘 要】
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目的:探究小檗碱对流感病毒感染的小鼠肺泡巨噬细胞NLRP3炎性复合体主要组分分子的表达以及炎性体活性的影响.方法:以A型流感病毒A/PR/8/34 (H 1N1)体外感染小鼠巨噬细胞(RAW264.7)为模型,分别设正常对照组(无血清培养24小时),病毒感染组(无血清培养,100倍TCID50病毒量持续感染24小时),小檗碱干预组(无血清培养,100倍TCID50病毒量感染的同时加入终浓度为6.2
【机 构】
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北京中医药大学基础医学院,北京,100029 北京中医药大学附属东方医院,北京,100029
【出 处】
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中华中医药学会免疫学分会第二次学术交流会暨中华中医药学会免疫学分会青年委员会成立大会
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目的:探究小檗碱对流感病毒感染的小鼠肺泡巨噬细胞NLRP3炎性复合体主要组分分子的表达以及炎性体活性的影响.方法:以A型流感病毒A/PR/8/34 (H 1N1)体外感染小鼠巨噬细胞(RAW264.7)为模型,分别设正常对照组(无血清培养24小时),病毒感染组(无血清培养,100倍TCID50病毒量持续感染24小时),小檗碱干预组(无血清培养,100倍TCID50病毒量感染的同时加入终浓度为6.25μg/mL的小檗碱干预24小时),每组设三个重复,分别提取各组巨噬细胞的全蛋白.利用Caspase-1活性测定试剂盒分析各组巨噬细胞蛋白的Caspase-1活性(活化的NLRP3炎性复合体释放的Caspase-1分子所具有的白介素转换酶活性),并通过蛋白印记法(Western Blot)以β-actin蛋白为内参,比较各组巨噬细胞中NLRP3炎性复合体主要组分(作为核心的NLRP3蛋白,接头蛋白ASC以及Caspase-1前体蛋白)的表达差异,特别是依赖Caspase-1转换酶才能产生的活性白介素分子IL-1β的表达变化.
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