论文部分内容阅读
沙棘黄酮具有降低AA肉鸡腹脂沉积的作用.但沙棘黄酮是混合物,不利于深入探究其作用机制.本试验以沙棘黄酮主要成分之一槲皮素为受试物,探讨对爱拔益加(AA)肉鸡脂肪细胞甘油三酯沉积过程中内分泌因子的作用,为开发新型饲料添加剂扩展思路,对减少畜禽脂肪过度沉积,提高人类肉品的营养价值,控制肥胖发生具有重要意义.本试验取10日龄AA肉鸡腹部脂肪,经机械破碎、酶消化等步骤分离、纯化并鉴定脂肪细胞.将脂肪细胞随机分5组,空白对照组为基础培养液(5% FBS高糖DMEM无酚红培养液),溶剂对照组为含2‰二甲基亚砜(DMSO)培养液,槲皮素组分别为含10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml槲皮素培养液,每组6个重复,培养24h、48h、72h后,分别收集细胞及培养液,采用酶法测定甘油三酯(TG)含量,采用放射性免疫法测定肿瘤坏死因子α(TNFα)含量,采用ELISA法测定脂联素(ADP)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白含量,采用RTPCR法测定PPARγ mRNA表达.结果显示:(1)脂肪细胞培养24h、48h、72h,溶剂对照组与空白对照组相比各指标差异均不显著(P>0.05);(2)与空白对照组相比,24h,3个槲皮素组TG含量均显著降低,40μg/ml槲皮素组TNFα和ADP含量均显著提高、PPARγ mRNA表达显著降低(P<0.05);48h,20μg/ml槲皮素组TG含量显著降低,3个剂量槲皮素组TNFα含量均显著提高、PPARγ mRNA表达和蛋白含量均显著降低(P<0.05),40μg/ml槲皮素组ADP含量显著提高(P<0.05);72h,3个槲皮素组TG含量、PPARγmRNA表达和蛋白含量均显著降低(P<0.05),TNFα和ADP含量均显著提高(P<0.05).结果提示,取10日龄AA肉鸡腹部脂肪采用机械破碎与酶消化结合法分离并鉴定可取得纯度高、生物活性好、储脂能力强的脂肪细胞;一定剂量槲皮素可通过促进TNFα表达进而抑制PPARγ含量,同时促进ADP表达来抑制TG的沉积.