【摘 要】
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提取Eimeria tenella北京株第二代裂殖子总RNA,根据sag10基因序列设计引物,应用RT-PCR技术扩增得到Eimeria tenella表面抗原基因sag10。该球虫表面抗原基因全长708bp,编码236个氨基酸。其中有7个核苷酸与报道序列(Genbank AJ586552)有差异,涉及4个氨基酸。将sag10与转化载体pFastBac-HIS8PP连接,构建了pFastBac-s
【机 构】
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中国农业科学院饲料研究所生态饲料研究室,北京 100081 Helmholtz Centre fo
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛
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提取Eimeria tenella北京株第二代裂殖子总RNA,根据sag10基因序列设计引物,应用RT-PCR技术扩增得到Eimeria tenella表面抗原基因sag10。该球虫表面抗原基因全长708bp,编码236个氨基酸。其中有7个核苷酸与报道序列(Genbank AJ586552)有差异,涉及4个氨基酸。将sag10与转化载体pFastBac-HIS8PP连接,构建了pFastBac-sag10表达质粒,转化大肠杆菌DH10 Bac后纯化得到病毒表达载体,转染Spodoptera frugiperda(Sf21)昆虫细胞后,获得的阳性重组杆状病毒,可在昆虫细胞中表达出约35kDa的抗原蛋白SAG10。
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根据肠炎沙门氏菌(SE)种特异性DNA序列,设计合成了一对能特异性扩增130bp片段的引物和TaqMan探针,首次建立了SE的种特异性荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)诊断方法。该法在SEDNA含量为9×108～9×104copies有较好的线性关系；检测SEDNA模板的灵敏度为4copies/μL,检测SE细菌数的灵敏度为6 CFU/mL；特异性试验表明只对SE基因组呈阳性反应。分别应用该技
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从广东某地区猪场的13份疑似猪败血性猪链球菌病、猪链球菌性脑膜炎和猪淋巴结脓肿猪链球菌病的病料中,分离纯化得到10株链球菌。通过对培养特性、形态特征、染色特性和生化特性等的观察判断,确定C群兽疫链球菌3株,D群猪链球1株,E群链球菌4株。通过药敏试验,10株细菌对先锋Ⅵ和恩诺沙星的敏感度最高；其次是阿莫西林、氯霉素、环丙沙星、青霉素、多粘菌素B、红霉素；链霉素、阿米卡星、卡那霉素、林可霉素、新霉素
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