【摘 要】
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目的:体外构建自体内皮化的同种生物心脏组织工程瓣(TEHV),为下一步建立动物体内移植模型提供材料基础,并最终为临床寻找理想的瓣膜替代材料建立技术方法。 方法:生物瓣
【机 构】
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中国医学科学院/中国协和医科大学/阜外心血管病医院外科
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目的:体外构建自体内皮化的同种生物心脏组织工程瓣(TEHV),为下一步建立动物体内移植模型提供材料基础,并最终为临床寻找理想的瓣膜替代材料建立技术方法。
方法:生物瓣支架选择经液氮保存的成人主动脉带瓣管道,用0.1％SDS脱去表面的内皮细胞(ECs);成人骨髓间充质干细胞(MSCs)体外经血管内皮细胞生长因子(VEGF)定向诱导分化的ECs作为种子细胞,高密度(>105cell/cm2)种植于瓣膜支架上静态培养20天后。在自制的脉动流培养装置中连续培养2周,分别用扫描电镜和0.5％硝酸银染色下立体显徽镜观察、摄片,以确定再内皮化程度。
结果:同种生物瓣支架表面的ECs完全脱去,而细胞外基质成份保存良好;MSCs体外经VEGF定向诱导培养14-21天后证实分化为ECs,并与生物瓣支架复合体静态培养第7、14、20天,再内皮化程度分别为73％、85％和92％;脉动流培养第7、10、14天其内皮化程度则分别为75％、50％和35％。
结论:人类MSCs来源的内皮细胞作为种子细胞,体外构建的TEHV在静态培养条件下基本达到了再内皮化的预期目标,然而仍需提高脉动流培养条件下ECs的黏附率。心脏生物组织工程瓣体外构建的研究仍有许多工作要做。
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