【摘 要】
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目的构建Ag85A-HA2原核表达载体并且表达融合蛋白,研究其免疫效果。方法通过PCR方法扩增Ag85A-HA2目的片段,克隆到pET--32a(+)原核表达质粒中,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表
【机 构】
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四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室;
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目的构建Ag85A-HA2原核表达载体并且表达融合蛋白,研究其免疫效果。方法通过PCR方法扩增Ag85A-HA2目的片段,克隆到pET--32a(+)原核表达质粒中,采用SDS-PAGE检测目的蛋白的表达,用分离纯化后的蛋白免疫小鼠,检测融合蛋白的免疫效果。结果经过PCR鉴定、双酶切鉴定和序列测定,原核表达载体pET-32a(+)/Ag85A-HA2成功地构建;SDSPAGE显示融合蛋白能够成功的表达;融合蛋白Ag85A-HA2对小鼠的肺指数抑制率达到39.30%,死亡保护率达到80%,效果明显高于对照组;小鼠的肺部病理切片也显示融合蛋白Ag85A-HA2对小鼠肺部的保护效果明显。结论成功地构建了Ag85A-HA2原核表达载体并且表达了融合蛋白,融合蛋白有良好的抗甲型流感病毒的效果。
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