论文部分内容阅读
研究背景:Wnt2b分子是第13个被克隆出的人Wnt基因,在人、小鼠、鸡和斑马鱼上都高度保守,对于器官生成与组织修复具有重要的生理意义。以往研究表明,Wnt2b分子在肝脏发育及再生过程中发挥重要作用,但对其在肝脏疾病状态下的作用研究甚少,尤其是关于Wnt2b分子在肝脏炎症及纤维化进程中的作用当前尚无报道。目的 :本课题旨在研究Wnt2b分子是否参与调控肝纤维的发生发展过程,并探讨相关机制。方法 :对比分析肝纤维化/肝硬化病人与健康对照肝组织中Wnt2b表达水平;构建硫代乙酰胺(TAA)及四氯化碳诱导小鼠肝纤维化模型,对比分析肝脏过表达/沉默Wnt2b对小鼠肝纤维化疾病进程的可能影响;利用小鼠原代肝星状细胞及人LX2星状细胞系评价Wnt2b对肝星状细胞的直接作用。结果 :与健康对照相比,纤维化肝脏组织中Wnt2b表达水平显著升高;进一步研究发现,肝实质细胞及活化肝星状细胞在压力诱导下均能高水平表达Wnt2b;与单纯化学诱导小鼠相比,肝内过表达Wnt2b组小鼠肝纤维化进程得以缓解,伴随α-SMA表达显著降低;而肝内沉默Wnt2b组小鼠肝纤维化进程加剧,伴随α-SMA表达显著升高;体外研究表明,Wnt2b可以自分泌及旁分泌形式抑制肝星状细胞活化;相关机制研究提示,Wnt2b通过抑制TLR4信号通路进而抑制肝星状细胞活化及纤维化发展。结论 :本研究在观察到Wnt2b分子与肝纤维化疾病进程相关的基础上,对其病理学意义进行了探究,发现Wnt2b可作为一种新型的TLR4信号通路负调分子,通过抑制纤维化进程中肝内TLR4信号进而抑制肝星状细胞活化及疾病发展,对肝纤维化早期干预提供一个新的研究靶标。同时本研究首次揭示了Wnt2b对于固有免疫中模式识别受体TLR4信号通路的抑制作用,提示Wnt2b可能参与调控机体炎症反应、败血症等病理生理过程。