【摘 要】
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目的 探讨携带重组人胰岛素(insulin)基因慢病毒载体转染的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)与丝素蛋白复合后在Wistar大鼠体
【机 构】
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兰州军区兰州总医院全军烧伤整形外科中心 甘肃兰州730050
【出 处】
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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会
论文部分内容阅读
目的 探讨携带重组人胰岛素(insulin)基因慢病毒载体转染的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)与丝素蛋白复合后在Wistar大鼠体内构建组织工程脂肪的能力. 方法 分离培养hUCMSCs,将携带重组人胰岛素基因慢病毒载体以最适MOI=10转染hUCMSCs,将转染组与未转染基因的hUCMSCs(对照组)分别接种于丝素蛋白支架,在体外含10％ FBS的LG-DMEM培养基中孵育1-2d,在成脂诱导剂中孵育5-7d后,移植于Wistar大鼠背部皮下.移植后12周取材,行荧光原位杂交技术鉴定与组织形态学和扫描电镜观察.结果 1.两组新生组织油红O染色均呈阳性,证明新生组织为脂肪组织,且转染组脂肪样细胞数量明显高于对照组,有显著性统计学差异(P＜0.01).2.HE染色显示,两组新生组织结构与正常脂肪组织相似,组织内及其周围可见明显新生血管,未降解支架材料周围有炎性细胞浸润；转染组支架材料降解明显,炎性细胞浸润明显少于对照组,新生血管数量也多于对照组.3.扫描电镜观察,两组新生组织内可见脂肪样细胞和新生血管,转染组新生组织内脂肪样细胞聚集成团,其结构与正常脂肪组织相似；对照组脂肪样细胞则散在分布于支架孔隙内.结论 携带重组人胰岛素基因慢病毒载体转染的hUCMSCs与丝素蛋白支架复合后,在Wistar大鼠体内能构建出组织工程化脂肪组织,其结构类似正常脂肪组织.
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