低氧条件下BMSC来源外泌体调控BMSC增殖及成骨成血管功能的体外研究

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目的研究低氧条件下骨髓间充质干细胞(BMSC)来源外泌体对BMSC增殖及成骨、成血管能力的影响,为丰富骨组织来源外泌体影响骨再生、血管形成理论提供实验数据。方法原代培养SD大鼠BMSC,选取P2-P5细胞进行本实验。分别提取常氧与低氧(1%氧浓度)条件下培养BMSC 0-48h(2天组)、49-96h(4天组)分泌外泌体。分别将外泌体加入BMSC培养液中作为实验组(常氧组及低氧组),设置空白对照。分别于24h、48h及72h使用CCK8技术检测细胞增殖活性,real-time PCR检测成骨及成血管相关基因m RNA变化。结果 CCK8结果显示实验组细胞存活率高于对照组,其中加入2天组外泌体组中常氧组细胞存活率高于低氧组;加入4天组外泌体组中低氧组细胞存活率高于常氧组。real-time PCR结果显示加入2天组外泌体上调OPN和BSP m RNA表达,加入4天组外泌体降低ALP、BSP m RNA表达,上调VEGFa、HIF1αm RNA表达。结论BMSC来源外泌体通过促进BMSC增殖及调控成骨成血管相关基因而影响成骨成血管能力。
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