miRNA-520c-3p在血管内皮细胞中的功能及分子机制研究

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动脉粥样硬化(Atheroserosis,AS)是发生在动脉血管壁以脂质代谢为特征的慢性炎症性疾病,主要表现为受累动脉内膜脂质沉淀引起内皮细胞功能障碍,单核细胞和淋巴细胞浸润及血管平滑肌细胞增生,形成泡沫细胞、脂纹和纤维斑块,最终引起血管壁硬化、管腔狭窄以及血栓形成,从而导致冠心病、周围血管病和脑血管疾病。内皮功能障碍是动脉粥样硬化的早期阶段,也是动脉粥样硬化的始动因素,同时内皮细胞的凋亡可导致动脉粥样硬化斑帽的坏死脱落,从而诱发血栓的形成,所以防止内皮细胞的凋亡,促进其增值是预防AS疾病发生的关键。同时,心血管疾病的发生发展与微小核糖核酸(micro RNAs)密切相关,micro RNAs作为一种调控因子参与多种转录后基因的表达,其直接与靶基因3’-UTR区完全或不完全互补结合,发挥负性调控功能。而miR-520c-3p是近年来在肿瘤中新发现的一种单链小分子RNA,且与动脉粥样硬化性疾病发生发展的联系尚未有报道。本研究主要探究miR-520c-3p在动脉粥样硬化中与血管内皮细胞的作用及其相关机制,以期为临床预防AS的发生发展提供新的思路。结果:(1)Real-time PCR结果显示在PDGF刺激下,血管内皮细胞中miR-520c-3p的表达量减少,同时靶基因RELA在mR NA水平以及蛋白水平的表达量均升高;(2)Western Blot结果表明在PDGF刺激下,pre-miR-520c-3p可以下调凋亡相关蛋白BAX、Caspase-9、Caspase-3的表达量和上调抗凋亡蛋白bcl-2的表达量;同时,anti-miR-520c-3p可以上调凋亡相关蛋白BAX、Caspase-9、Caspase-3的表达量和下调抗凋亡蛋白bcl-2的表达量;(3)CCK-8细胞增殖实验表明pre-miR-520c-3p能促进血管内皮细胞的增殖,anti-miR-520c-3p能抑制内皮细胞的增殖;(4)内皮细胞粘附实验表明pre-miR-520c-3p可以减少血管内皮细胞的粘附数量,而同时Anti-miR-520c-3p可以促进细胞间的粘附作用,引起炎症反应。结论:1.我们的研究表明了miR-520c-3p对血管内皮细胞具有明显的促进增殖以及通过调节凋亡相关蛋白的表达发挥抗凋亡作用;2.miR-520c-3p是通过作用于RELA从而抑制NF-κB信号传导通路发挥抗凋亡作用。
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