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目的调查上海医院补液室及病房空气中葡萄球菌耐甲氧西林mecA基因携带比例,研究耐药菌株的分布情况;同时检测葡萄球菌样品生物被膜形成情况,评估医院空气中葡萄球菌感染风险。方法用营养琼脂平板采集上海市区9座三级甲等医院补液室及病房空气样品,培养后,通过革兰染色镜检及生化试验对分离细菌进行鉴定,对葡萄球菌进行纯化培养。提取葡萄球菌样品基因组,采用PCR法检测葡萄球菌mecA基因SCCmee片段的携带率,同时检测葡萄球菌菌株生物被膜形成相关基因icaA、fbe、aap的携带率。将阳性样品PCR产物进行测序,并采用Mega5.05分析同源性。采用生物膜半定量检测方法对葡萄球菌样品进行检测,选取部分阳性样品用电镜验证并观察生物被膜的形态结构。结果医院空气中革兰阳性菌株样品占总样品的78.83%,经纯化,共分离得到葡萄球菌样品64株。54.69%的葡萄球菌样品携带SCCmec基因片段,icaA基因无检出,fbe基因检出率为45.31%,aap基因检出率为6.25%。序列分析显示,SCCmec同源性较高,达到100%,fbe的基因进化树显示样品基因序列分为2簇,同簇内基因序列同源性较高。生物被膜半定量检测显示,14.06%的样品在570 nm的吸光度显著性大于生物被膜阴性对照株,经扫描电子显微镜与透射电子显微镜验证,阳性样品与阳性对照株形态相似,呈团块状,而阴性样品与阴性控制株在电镜下均球形,分散排列。结论在上海医院补液室及病房空气中,葡萄球菌耐甲氧西林相关基因SCCmec的高携带率提示医院耐药性情况较为严重,同时医院空气中有一定比例生物被膜阳性葡萄球菌。因此,需对医院空气中耐药性葡萄球菌在医院环境中扩散及可能引起的机会性感染加以重视。