【摘 要】
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背景与目的：星形胶质细胞在兴奋后可释放出多种神经递质至突触间隙,这些由星形胶质细胞释放出的神经递质被称为胶质递质.因此,星形胶质细胞被认为是中枢神经系统突触信息传递及调控过程的重要组成部分.本实验旨在探究全身麻醉药物对皮层星形胶质细胞的作用,观察全身麻醉药物对星形胶质细胞钙瞬变及胶质递质释放的影响,分析其可能作用机制,为全麻机制研究提供新思路.方法：培养并纯化大鼠皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色技术
【出 处】
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中国药理学会麻醉药理专业委员会第七次全国学术年会暨甘肃省医师协会麻醉医师分会成立大会
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背景与目的：星形胶质细胞在兴奋后可释放出多种神经递质至突触间隙,这些由星形胶质细胞释放出的神经递质被称为胶质递质.因此,星形胶质细胞被认为是中枢神经系统突触信息传递及调控过程的重要组成部分.本实验旨在探究全身麻醉药物对皮层星形胶质细胞的作用,观察全身麻醉药物对星形胶质细胞钙瞬变及胶质递质释放的影响,分析其可能作用机制,为全麻机制研究提供新思路.方法：培养并纯化大鼠皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色技术鉴定星形胶质细胞纯度；反射荧光成像系统动态观察丙泊酚、氯胺酮以及右旋美托咪啶对二磷酸腺苷诱发星形胶质细胞胞内钙瞬变的影响；ELISA法检测胞内三磷酸肌醇的水平变化；应用液相色谱技术,观察全麻药物作用下皮层星形胶质细胞谷氨酸,γ-氨基丁酸,丝氨酸的释放情况；最后使用M型乙酰胆碱受体受体阻断剂与N-甲基-D天冬氨酸受体阻断剂,明确全麻药物对星形胶质细胞作用的靶点受体.结果：1.免疫荧光染色鉴定所培养皮层星形胶质细胞纯度大于90％；2.100 nM～ 100 μM ADP均可诱发培养的皮层星形胶质细胞钙瞬变,且呈浓度依赖趋势.1 μM、10 μM、100μM的ADP能诱发出显著的钙瞬变,且差异显著(P＜0.01),经测算ADP激活培养星形胶质细胞的EC50为208.04±14.94 nM；3.Ket可呈浓度依赖性抑制10 μMADP诱发的星形胶质细胞钙瞬变,且IC50为236.23±3.62μM；而Propofol(100 μM)和Dex(50 μM、100 μM)未能对10μM ADP诱导产生的星形胶质细胞钙瞬变产生明显影响(P＞0.05)；4.1 μM ADP可显著提升星形胶质细胞内IP3水平(P＜0.01)；然而Ket、M型乙酰胆碱受体阻断剂阿托品和NMDA受体阻断剂均对10 μM ADP作用下星形胶质细胞内IP3水平没有影响(P＞0.05)；5.Ket并不影响ADP作用下星形胶质细胞Glu,Ser的释放水平(P＞0.05).结论：1.三种麻醉药物中,仅有Ket可以呈浓度依赖趋势抑制ADP诱发的星形胶质细胞钙瞬变；2.ADP的应用可以显著提升星形胶质细胞内IP3水平；3.细胞内IP3途径可能没有参与Ket抑制ADP诱发星形胶质细胞钙瞬变的作用机制；4.Ket抑制ADP诱发星形胶质细胞钙瞬变并不能有效影响Glu,和Ser的释放.
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