【摘 要】
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[目的]探讨饮用水有机提取物致肝细胞毒作用机制,并进行针对性干预,为饮用水有机污染物暴露致肝损伤的早期干预及预防控制提供线索.[方法]依据参考文献及预实验结果,设5
【机 构】
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贵州医科大学公共卫生学院,贵州550025
【出 处】
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中国毒理学会第七次全国毒理学大会暨第八届湖北科技论坛
论文部分内容阅读
[目的]探讨饮用水有机提取物致肝细胞毒作用机制,并进行针对性干预,为饮用水有机污染物暴露致肝损伤的早期干预及预防控制提供线索.[方法]依据参考文献及预实验结果,设5个染毒组：0.3125L/ml、0.6250 L/ml、1.2500 L/ml、2.5000L/ml、5.0000 L/ml,溶剂对照组和空白对照组,染毒处理72h.干预实验中设空白对照组、溶剂对照组、2.5L/ml有机物组(阳性对照)、2.5L/ml有机物+FasL抑制剂组、2.5L/ml有机物+Caspase3抑制剂组,处理72h.采用全自动生化分析仪、流式细胞仪进行干预前后肝细胞损伤及肝细胞凋亡情况的检测.采用实时荧光定量聚合酶链反应及蛋白质免疫印迹法检测相关基因转录及翻译水平.[结果]1.染毒L02细胞的CHE、ALT及AST活性在0.625L/ml以上剂量组明显升高,TP及ALB水平则在高剂量组明显降低(p＜0.05).2.死亡受体通路中,Fas、FasL、Caspase 8及Caspase 3基因的mRNA转录及蛋白表达水平在中、高剂量组明显升高,PARP-1的表达水平则在中、高剂量明显降低(p＜0.05).线粒体通路中,Bcl-2的mRNA转录及蛋白表达水平随染毒剂量的增加而下调(p＜0.05),Bax、CytC及Caspase9的表达水平则随染毒剂量的增加而上调(p＜0.05).内质网通路中,Calpain-1及Caspase12的mRNA转录及蛋白表达水平无明显变化(p＞0.05). 3.抑制剂干预研究：予以FasL抑制剂后,FasL、Caspase8及Caspase3基因的蛋白表达水平均明显下降,PARP-1基因的蛋白表达则明显升高(p＜0.05).予以Caspase3抑制剂作用后,Caspase3基因的蛋白表达亦水平明显受抑,PARP-1的蛋白表达水平明显升高(p＜0.05).FasL抑制剂及Caspase3抑制剂作用后,Bcl-2基因的蛋白表达水平明显升高,Bax、CytC及Caspase9基因的蛋白表达水平则明显降低(p＜0.05).
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