南美白对虾虾头内源碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性研究

来源 :“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ooo2231
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以南美白对虾虾头为原料,采用层析技术和电泳技术等对虾头内源碱性蛋白酶进行研究,结果表明:将虾头进行组织捣碎,所得到的粗酶液用20%~80%的硫酸铵进行盐析、Q-Sepharose F.F离子交换柱纯化及Sephadex G-150凝胶柱纯化,得到虾头内源碱性蛋白酶纯品,其比活为1386.16 U/mg,得率为32.8%;经SDS-PAGE电泳显示为单一条带,该酶的分子量为79.95 kDa。测得其最适温度为50℃,热稳定较好;最适pH为8.0;该酶的Km值和Vmax值分别为2.54 g/L和7.11 ug/min。金属离子Fe3+、Mn2+、Hg+对蛋白酶有完全抑制作用。丝氨酸蛋白酶抑制剂能完全抑制该酶活性,胃蛋白酶抑制剂和EDTA对该酶有一定的抑制作用,DTT能激活该酶活性,据此推测该酶为丝氨酸蛋白酶,酶活中心可能还含有少量的金属离子。
其他文献
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在本工作中,研究了加入微粉级单质硅对Si3N4-SiC耐火材料生产工艺及制品性能的影响,结果表明:加入微粉级单质硅能够改善泥料的成型性能,有利于氮化硅结合碳化硅制品的成型;加入微粉级单质硅,能够降低氮化烧成温度、缩短烧成最高温度的保温时间;随着微粉级单质硅加入量的增加,制品的显气孔率整体上呈下降的趋势,常温耐压强度和高温抗折强度呈现上升。
为利用微生物以解决鱼露的快速发酵问题,本实验采用平板透明圈法初筛、摇瓶复筛,从半年鱼露发酵液中筛选到一株产蛋白酶乳酸菌T1。考察其生理生化性质、酶学特性,并添加入鱼露发酵液中进行发酵试验。结果显示:经形态特征观察,初步鉴别T1乳酸菌为芽孢杆菌属(Bacillus sp.);其最适生长温度为32℃,pH为5.5;所产蛋白酶酶活最适温度为40℃,pH为7.0,最适条件下酶活力达72.2 U/mL;添加
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