【摘 要】
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目的 观察四硫钼酸盐(TM)治疗Wilson病铜负荷模型大鼠其肝、脑组织MAKP信号通路中P38、 ERK、JNK等蛋白表达水平,探讨P38、ERK、JNK等信号通路参与WD肝及脑损伤的作用机制以及TM调节上述信号通路的肝、脑损伤保护机制,为TM治疗WD提供实验理论依据.方法 SPF级雄性SD大鼠80只随机分为正常组、模型组、TM组、PCA组各20只.除正常对照组予以普通饲料,其余3组均参照文献制
【机 构】
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安徽中医药大学神经病学研究所附属医院 230061
【出 处】
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2013中国医师协会中西医结合医师大会
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目的 观察四硫钼酸盐(TM)治疗Wilson病铜负荷模型大鼠其肝、脑组织MAKP信号通路中P38、 ERK、JNK等蛋白表达水平,探讨P38、ERK、JNK等信号通路参与WD肝及脑损伤的作用机制以及TM调节上述信号通路的肝、脑损伤保护机制,为TM治疗WD提供实验理论依据.方法 SPF级雄性SD大鼠80只随机分为正常组、模型组、TM组、PCA组各20只.除正常对照组予以普通饲料,其余3组均参照文献制作铜负荷大鼠模型,即予含硫酸铜1g/kg的饲料和0.185%硫酸铜的水,饲养12周,各组大鼠每天进食相等,并自由饮水.第13周起TM组予TM喂饲2mg/(kg*d),PCA组予PCA喂饲0.09g/(kg*d).第16周结束时,各组大鼠经水合氯醛麻醉后,随机于各组大鼠中分别选取3只大鼠,腹腔内注射10%水合氯醛,动物经水合氯醛麻醉后,经灌注后小心将大鼠肝、脑组织取出,置于4%PA中固定24h,经免疫组化-DAB染色法检测P38、ERK、JNK等蛋白表达;后在余下大鼠中分别取10只大鼠肝、脑组织各0.3g,经匀浆制成蛋白匀浆液后行Western-Blot检测P38、ERK、JNK等蛋白表达水平.结果 1.免疫组化法检测P38、ERK、JNK表达:模型组及各治疗组均可见阳性细胞表达,模型组阳性表达较其他各组均显著增强(P<0.01),TM组肝组织各蛋白阳性表达较PCA组增强(P<0.05),但TM组脑组织各蛋白阳性表达较PCA组减弱(P<0.05).JNK蛋白在脑组织未见明显阳性细胞表达.2.Western-Blot法检测P38、ERK、JNK蛋白的表达:各蛋白水平在各组之间比较有显著差异,模型组各蛋白阳性表达量显著增强(P<0.01),TM组、PCA组、中药组与模型组比较,阳性蛋白相对表达量显著下降(P<0.01),TM组较PCA组阳性蛋白表达量有增高趋势(P>0.05).JNK蛋白在脑组织未见特异性蛋白条带表达.结论 TM能够下调铜负荷大鼠肝和脑组织中P38、ERK、JNK等蛋白的磷酸化水平,是改善肝和脑组织损伤的重要原因.
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