【摘 要】
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本研究以水溶性碳化二亚胺(EDAC)为介质,将兔抗禽流感病毒NP蛋白抗体共价偶联到羧化乳胶表面,建立了一种快速的禽流感病毒乳胶凝集检测方法,可以从鸡胚尿囊液、喉头拭子、泄殖腔拭子和内脏组织中快速检测所有亚型的禽流感病毒.该方法对肺脏组织的检出率可达97.9％,对肾脏、脑、肝脏、脾脏等组织的检出率均达到90％以上,对喉头拭子和泄殖腔拭子的检出率也达到60％以上,与鸡新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊
【机 构】
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华中农业大学动物医学院,武汉,430070 华中农业大学动物医学院,武汉,430070;华中农业大
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会
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本研究以水溶性碳化二亚胺(EDAC)为介质,将兔抗禽流感病毒NP蛋白抗体共价偶联到羧化乳胶表面,建立了一种快速的禽流感病毒乳胶凝集检测方法,可以从鸡胚尿囊液、喉头拭子、泄殖腔拭子和内脏组织中快速检测所有亚型的禽流感病毒.该方法对肺脏组织的检出率可达97.9％,对肾脏、脑、肝脏、脾脏等组织的检出率均达到90％以上,对喉头拭子和泄殖腔拭子的检出率也达到60％以上,与鸡新城疫病毒(NDV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、传染性支气管炎病毒(52、120株)、鸡减蛋综合征病毒(EDSV-76)、禽副粘病毒2型(PMV-2)均不反应,达到了较好的的特异性和敏感性.该方法与病毒分离鉴定的符合率为94.2％,与胶体金试纸条的符合率为96.7％.结果证明建立的乳胶凝集检测方法具有快速简便,成本低廉,敏感特异的特点,可用于临床大规模的流行病学调查.
其他文献
本研究利用同源重组的方法成功构建了一株表达新城疫病毒HN基因的重组禽腺病毒(rFAdV-HN).用rFAdV-HN重组病毒感染CH-SAH细胞,运用Northern blot分子杂交及RT-PCR方法在感染12h后可检出HN信使RNA(mRNA),运用放射免疫沉淀方法在感染24h时可检出HN蛋白.
本研究利用壳聚糖为囊材,新城疫病毒液为芯材,戊二醛为交联剂,选择适当的乳化体系,制备出粒径小、分散性好的疫苗微球.与La Sota活疫苗、灭活疫苗同时对比免疫SPF鸡,进行MTT试验、血清IgG检测、攻毒保护试验等,证实新城疫壳聚糖微球疫苗具有较好的免疫效果.
鸡新城疫与大肠杆菌混合感染,经剖检、血清学试验、细菌培养、药敏试验等综合诊断,选用最敏感的药物进行防治.
本研究选取国内1999～2005年发生的24株NDV,经CEF蚀斑纯化和SPF鸡胚增殖,对其融合蛋白(F)和血凝素-神经氨酸酶(HN)基因分别进行克隆测序,结合在GenBank中发表的具有F和HN基因的34株NDV毒株,利用DNAStar软件,参照传统对F基因分型的方法,对上述毒株的F或HN基因进行基因分型,比较其差异.结果表明:F和HN的基因分型具有相似性,符合率79.3％.但新近分离的毒株,分
本研究根据GenBank上所公布的新城疫病毒(NDV)的全基因组序列,设计了8对引物,运用RT-PCR方法获取了3株广西地方强毒株GX7/02、GX9/03和GX11/03的全基因组序列,并对其进行了比较分析.此3株病毒的全基因组序列均由15192个碱基组成,与GenBank公布的ZJ1、U.S/Largo/71、Italy/2736/00等7个毒株的全基因组序列长度相同,比LaSota、Clon
本研究用pGenesil-3 vector,构建了针对新城疫病毒NP基因的3个短发夹RNA表达载体,将其与转染试剂SiLentFectTM Lipid Reagent按1:3比例混合均匀后与新城疫病毒同时经绒毛尿囊腔接种于鸡胚中,17h后检测尿囊液中病毒的血凝价.结果表明,针对NP基因的3个位点的干涉质粒中,shRNA-NDV1有效地降低了病毒血凝价,对病毒的增殖产生了显著地抑制效应.
2005年8月,孟兴庄某饲养户,共饲养蛋鸡3500只,其中210日龄的经产蛋鸡2000只,初产蛋鸡1500只;8月15日该户饲养的经产蛋鸡发病,表现为甩头、鼻腔内有粘液、拉白色或绿色稀粪,遂认为是呼吸道疾病,用强力霉素配合慢呼泰乐(主要成分是泰乐菌素),加电解多维等药物,治疗5日无效,发现有360多只精神不振,呆立或有瘫痪,食欲废绝,饮水减退,拉白色黏液样或绿色稀粪,21日已有70余只死亡,初产蛋
本研究采取体外反应和口服两种方法评价2种中药对新城疫病毒的抑制效果.将不同浓度的2种中药与等量的200ELD50病毒于37℃条件下充分作用30分钟后,接种10日龄SPF鸡胚.试验结果表明:在试管中,1:10、1:20、1:40稀释度的编号为BJ-A的中药与新城疫病毒作用30分钟,有显著的杀灭病毒作用,但杀灭原因尚需进一步验证;将高、中剂量的BJ-A中药、市售中药(中药对照组)和利巴韦林(对照西药组
目前检测禽流感病毒的技术包括病毒的分离鉴定,PCR或荧光PCR方法和抗原捕获ELISA.病毒的分离鉴定需要的时间很长,PCR或荧光PCR方法由于需要专业的设备和人员,而限制了其广泛使用.有关研究人员一直探讨利用单克隆抗体技术检测禽流感病毒,并建立了一些相关技术.本研究建立了检测禽流感病毒抗原的双抗体夹心ELISA方法.
本研究使用抗禽流感病毒NP蛋白的单抗作为包被抗体,纯化的兔抗AIV-NP作为一抗,羊抗兔IgG-HRP作为二抗,建立了检测禽流感病毒的双夹心ELISA方法.样品使用Triton X-100处理后最低检测量可达2.5ng.15个HA亚型(H1-15)的禽流感病毒使用此方法检测均为阳性,而其他一些禽病病原检测为阴性.与鸡胚分离同时检测805份鸡的组织样品,两者符合率达到了98.6％.使用本方法与我国市